磷酸二酯酶9A(PDE9A)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品：ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標簽) Protein
三葉因子1(TFF1)重組蛋白 Recombinant Trefoil Factor 1 (TFF1)
DHRS9重組人 DHRS9 蛋白 (His 標簽) Protein
ADH7 Protein Human 重組人 CAMK2A / CAMKA 蛋白 (GST 標簽

僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Phosphodiesterase 9A (PDE9A)

High affinity cGMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase 9A

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞膜, 細胞質(zhì), 高爾基體

預(yù)測分子量：34.2kDa

實際分子量：35kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ile290~Arg549 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：5.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

標簽選擇：

親和標簽：蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標簽可分兩類：一類是短肽類標簽,；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,，大致步驟如下：

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白,；表達蛋白的分析、純化,、檢測

　　誘導(dǎo)表達成功后,，表達蛋白的分析、純化,、檢測應(yīng)該順當,，按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

注意事項：  

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,，應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2,、雖然作用溫和,，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,，切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果,。因此,，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復(fù),，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。

4、本產(chǎn)品對人體有害,，操作時請小心,，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5,、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作

相關(guān)產(chǎn)品：

三葉因子1(TFF1)重組蛋白 Recombinant Trefoil Factor 1 (TFF1)

ADH7 Protein Human 重組人 CAMK2A / CAMKA 蛋白 (GST 標簽)

ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 (Fc 標簽) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白 (Fc 標簽)

DHRS9重組人 DHRS9 蛋白 (His 標簽) P

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用（PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）,。

1,、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液,，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸,。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞,，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,，再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,，必需分裝成 50-100 萬細胞/管,，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解,。

2,、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清,，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。

豬鼻支原體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mycoplasma hyorhinisPCR 50T

中山病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Chuzan VirusRTPCR 50T

中華鱉球狀病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Trionyx Sinensis Spherovirus(TSSV)PCR 50T

指環(huán)蟲屬通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Dactylogyrus spp.PCR 50T

NO mouse ELISA(小鼠)Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CNTFR Alpha 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Nox1/NADPH oxidase 1 有絲分裂氧化酶1抗體 規(guī)格 0.1ml

Human keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 人角化細胞內(nèi)分泌因子 96T

TAS2R9 英文名稱： 味覺受體蛋白家族2亞基9抗體 0.2ml

C6orf186 英文名稱： 6號染色體開放閱讀框186抗體 0.2ml

Anti-CNTFR Alpha 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

磷酸二酯酶9A(PDE9A)重組蛋白摩氏摩根菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Morganella morganiiPCR

滅鮭氣單胞菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Aeromonas salmonicidaPCR

綿羊星狀病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Ovine Astrovirus 1（OAstV）1RTPCR

綿羊星狀病毒通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Ovine Astrovirus （OAstV）RTPCR