雙特異性磷酸酶6(DUSP6)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品：IL25重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CK19 細(xì)胞角蛋白19多肽抗原 0.5mgCK19 細(xì)胞角蛋白19多肽抗原
LMAN2重組人 LMAN2 / VIP36 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
AFP Protein Human 重組人 AFP / alpha-fetoprotein 蛋白 (His 標(biāo)簽)
M

僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Dual Specificity Phosphatase 6 (DUSP6)

MKP3; PYST1; Mitogen-activated protein kinase phosphatase 3

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human,，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：36.9kDa

實際分子量：37kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Met1~Ser300 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：4.7

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達(dá)過程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易；另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽,；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,，大致步驟如下：

真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達(dá)載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達(dá)小試，條件優(yōu)化

f.       表達(dá)分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達(dá)

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟：

a.      選擇表達(dá)載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株

e.      蛋白表達(dá)小試分析

f.       如果蛋白可溶,，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白,；表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測

　　誘導(dǎo)表達(dá)成功后,，表達(dá)蛋白的分析、純化,、檢測應(yīng)該順當(dāng),，按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

注意事項：  

1,、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2,、雖然作用溫和,，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,，切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果,。因此,，4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進(jìn)行修復(fù),，然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作,。

4、本產(chǎn)品對人體有害,，操作時請小心,，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5,、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作

相關(guān)產(chǎn)品：

CK19 細(xì)胞角蛋白19多肽抗原 0.5mgCK19 細(xì)胞角蛋白19多肽抗原

AFP Protein Human 重組人 AFP / alpha-fetoprotein 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL25重組小鼠 IL25 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

MME Protein Mouse 重組小鼠 CD10 / Neprilysin / MME 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LMAN2重組人 LMAN2 / VIP36 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用（PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）,。

1,、樣品前處理：

a)對于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,，使裂解液和細(xì)胞充分接觸,。

b)對于懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指把細(xì)胞用力彈散,。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,，再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀,。如果細(xì)胞量較多,，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管，然后再裂解,。

c)對于組織樣品： 切成細(xì)小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,，直至充分裂解,。

2、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,，取上清,，即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。

唾液鏈球菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Streptococcus salivarius PCR 50T

兔粘液瘤病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Rabbit Myxomatosis Virus(RMV)PCR 50T

透明毛圓線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Trichostrongylus vitrinusPCR 50T

同豬皰疹病毒型豬巨細(xì)胞病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Porcine Cytomegalovirus （PCMV,，2）PCR 50T

NIS(Na+/I-symporter;NIS) 碘轉(zhuǎn)運體蛋白(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Integrin alpha 2b/CD41 血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh p70 S6 kinase alpha 0酸化核糖體p70 S6蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

FCN1 Kit Human 人 Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 ELISA配對抗體 ELISA

TSPAN20 英文名稱： 四分子交聯(lián)體20抗體(四旋蛋白) 0.2ml

C5ORF33 英文名稱： 5號染色體開放閱讀框33抗體 0.2ml

Anti-Integrin alpha 2b/CD41 血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

雙特異性磷酸酶6(DUSP6)重組蛋白曼那角病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Menangle virusRTPCR

麥芽香肉桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Carnobacterium maltaromaticumPCR

瑪爾摩分枝桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mycobacterium malmoenesPCR

馬隱秘桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Arcanobacterium equiPCR