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唾液酸乙酰酯酶(SIAE)重組蛋白

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更新時間:2023-04-10 15:58:08瀏覽次數(shù):296

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 說明書
應用領域 化工 主要用途 用于科研
英文名稱 Recombinant Sialic Acid Acetylesterase (SIAE) 物種 Homo sapiens (Human,人)
來源 原核表達 應用 Cell culture; Activity Assa
唾液酸乙酰酯酶(SIAE)重組蛋白的相關產(chǎn)品:CD24重組小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 (Fc 標簽) Protein
凋亡相關因子配體(FASL)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)
NAPG重組人 NAPG / Gamma SNAP 蛋白 (His 標簽) Protein
AK4 Protein

詳細介紹

標簽選擇:

親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHOHEK293

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試,,條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAEWB

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

性狀

來源

唾液酸乙酰酯酶(SIAE)重組蛋白

Homo sapiens (Human,,人)

凍干粉

原核表達

英文名稱:Recombinant Sialic Acid Acetylesterase (SIAE)

YSG2; CSE-C; LSE; Sialic Acid-Specific Acetylesterase II; Sialic acid-specific 9-O-acetylesterase

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::n/a

預測分子量:51.6kDa

實際分子量:54kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Ala22~Pro244 (Accession # Q9HAT2) with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% TrehaloseProclin300.

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點:-

應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

相關產(chǎn)品:

凋亡相關因子配體(FASL)重組蛋白 Recombinant Factor Related Apoptosis Ligand (FASL)

AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標簽)

CD24重組小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 蛋白 (Fc 標簽) Protein

IGFBP3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP3 蛋白 (His 標簽)

NAPG重組人 NAPG

1.png

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白,。

h.      鑒定,,包括SDS-PAGEWB鑒定

GZMH蛋白;表達蛋白的分析,、純化,、檢測

  誘導表達成功后,表達蛋白的分析,、純化,、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。

操作步驟 :

根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。

1、樣品前處理:

a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,,用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,,然后再裂解,。

c)對于組織樣品: 切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解。

2,、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

木霉屬通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Trichoderma spp.PCR 50T

莫佩亞病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mopeia Virus(MOPV)RTPCR 50T

綿羊星狀病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Ovine Astrovirus 1OAstV1RTPCR 50T

綿羊皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Ovine HerpesvirusOHV)PCR 50T

N-cadherin N-鈣粘附分子抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

Anti-Apelin receptor Apelin receptor抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Bad(Ser112) 0酸化相關死亡促進因子抗體 規(guī)格 0.1ml

山羊抗兔 IgG(H+L)/FITC 0.1ml 綠色熒光,,Jackson公司分裝

Von Willebrand Factor 英文名稱: 血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗體 0.1ml

Dppa4 英文名稱: 多能發(fā)育相關基因4抗體 0.1ml

Anti-Apelin receptor Apelin receptor抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

唾液酸乙酰酯酶(SIAE)重組蛋白亮熱厲螨PCR檢測試劑盒 英文名稱; Tropiladaps clareaePCR

兩岐雙岐桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bifidobacterium bifidumPCR

鏈狀帶絳蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Taenia soliumPCR

鏈球菌組PCR檢測試劑盒無乳? 英文名稱; Group B Streptococcus spp.(GBS) BPCR ,?

注意事項:  

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。

2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時間過久會導致組織變脆,,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。

4、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5,、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作


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