相關(guān)產(chǎn)品:
T4-BSA 甲狀腺素T4偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mgT4-BSA 甲狀腺素T4偶聯(lián)牛血清白蛋白
AKT2 Protein Human 重組人 AKT2 / protein kinase B β / PKB beta 蛋白 (His & GST 標簽)
TNFSF11重組人 RANKL / OPGL / TNFSF11 / CD254 蛋白 Protein
PLAT Protein Human 重組人 tPA / PLAT 蛋白
FLT3重組人 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 (His 標簽
僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 物種 | 性狀 | 來源 |
單酰甘油-O-?;D(zhuǎn)移酶2(MOGAT2)重組蛋白 | Homo sapiens (Human,人) | 凍干粉 | 原核表達 |
英文名稱:Recombinant Monoacylglycerol-O-acyltransferase 2 (MOGAT2)
MGAT2; DGAT2L5; DC5; 2-Acylglycerol O-Acyltransferase 2; Diacylglycerol O-acyltransferase candidate 5; Diacylglycerol acyltransferase 2-like protein 5
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,,人)
來源:原核表達
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細胞定位::內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔
預(yù)測分子量:22.8kDa
實際分子量:22kDa(差異分析請參閱說明書)
片段與標簽:Leu48~Gly217 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:10.0
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
![1.png 1.png](https://img64.chem17.com/1cba7c2130d463f01b1a00885169153f37857f2e88976f05a4e8bf215c90e24311b3e38cef1a5c0e.png)
標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析,。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構(gòu)建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉(zhuǎn)染
e. 表達小試,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達蛋白的分析、純化,、檢測
誘導(dǎo)表達成功后,,表達蛋白的分析、純化,、檢測應(yīng)該順當,,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加),。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下,,使裂解液和細胞充分接觸,。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散,。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀,。如果細胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解,。
c)對于組織樣品: 切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,,直至充分裂解,。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,,取上清,,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。
藍舌病病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bluetongue Virus(BTV)8RTPCR 50T
拉沙熱病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Lassa Fever Virus(LASV)RTPCR 50T
潰蝕齒密PCR檢測試劑盒 英文名稱; Treponema phagedenisPCR 50T
庫皮科斯病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cupixi virus(CPXV)RTPCR 50T
Nanog fragment 干細胞關(guān)鍵蛋白(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Apaf-1(NT) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Bad(Ser134) 0酸化相關(guān)死亡促進因子抗體 規(guī)格 0.1ml
山羊抗大鼠 IgG(H+L)/FITC 0.1ml 綠色熒光,Jackson公司分裝
VPS18 英文名稱: 空泡分選蛋白18抗體 0.1ml
Dlx1 英文名稱: 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX1抗體 0.2ml
Anti-Apaf-1(NT) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
單酰甘油-O-?;D(zhuǎn)移酶2(MOGAT2)重組蛋白藍舌病病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bluetongue Virus(BTV)8RTPCR
藍舌病病毒通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Bluetongue Virus(BTV)RTPCR
萊氏無膽甾原體PCR檢測試劑盒 英文名稱; Acholeplasma laidlawii PCR
萊氏泰勒蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Theileria lestoquardiPCR
注意事項:
1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間,。
2,、雖然作用溫和,但能硬化組織,,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時,。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙,。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,,影響免疫組化結(jié)果,。因此,,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。
4、本產(chǎn)品對人體有害,,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
5,、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作