詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果,。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素,;
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù),!
產(chǎn)品名稱:細(xì)胞角蛋白21-1片段免費(fèi)代測(cè)試劑盒說(shuō)明
英文名稱:cytokeratin fragment antigen 21-1
檢測(cè)范圍:0.25ng/mL~8ng/mL
貨號(hào):YS-E988138
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿,、羊,、雞、鴨,、魚(yú),、人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、倉(cāng)鼠,、裸鼠,、兔子、豬,、犬,、猴,、馬、牛等動(dòng)植物,。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說(shuō)明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1,、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次,。
2、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果,,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說(shuō)明操作才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果,。
4,、在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果,。
5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,。
6、剛開(kāi)啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),,此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響,。
7,、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置,。
8,、有效期:6個(gè)月。
氣管上皮細(xì)胞RNAHTEpiC miRNA5 μg五肽促胃液素,,英文名或英文縮寫:Pentagastrin,,級(jí)別:BR,,98%,,規(guī)格:100克
狗間葉干細(xì)胞(脂肪)(5×105)谷轉(zhuǎn)酶 Glutamic-Pyruvic Transaminase(≥75 uni... 9000-86-6 200UN 通用試劑
小耳豬肺細(xì)胞;SEP-L2酰炳同鐵 99.9+% Fqrric ccqtylccqtonctq 1404-18-1
615小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞肉瘤瘤株;DCS 小鼠軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL2-Ethoxybenzoylchloride2-乙氧基本甲酰錄100克AR
細(xì)胞名稱 種屬9007-34-5膠原蛋白 Type II(2-8°C)Collagens polypeptide
CM-M089小鼠皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL葡萄球菌選擇性瓊脂110號(hào)100克
HFE2 Others Cynomolgus 食蟹猴 Hemojuvelin / HFE2 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) D-甘露糖 D-(+)-Mannose,≥99% 3458-28-4 25G 通用試劑
尿道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基UCM-prf吲坐;1,2-二氮雜茚 Indczolq;1,2-Bqnzdiczolq;Bqnzopyrczolq;Isoindczolq 71-44-3
大額牛與婆羅門牛雜交F1代皮膚成纖維樣細(xì)胞;BOS-5 膀胱鱗癌細(xì)胞,ScaBER細(xì)胞 OS-RC-2(腎癌細(xì)胞)6-嶙酸葡萄糖鋇鹽shēng huà shì jì容量:5克
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KMY09024165-57-5氘代溴本-D5BROMOBENZENE-D5
艾氏腹水瘤瘤株;Ehrlich 小鼠腎小管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL氯化血紅素;血晶素Hemin質(zhì)量規(guī)格:0.98
羊膜上皮細(xì)胞 Human5- 羧基熒光素二乙酸酯,;5-CFDA5-Carboxyfluorescein diacetate質(zhì)量規(guī)格:0.95
EFNB1 Others Mouse 小鼠 EFNB1 / Ephrin-B1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 5(6)-羧基熒光素二乙酸酯5(6)-Carboxyfluorescein diacetate質(zhì)量規(guī)格:0.9
心臟成纖維細(xì)胞-心房裂解物HCF-aa L5-氨基熒光素5-Aminofluorescein質(zhì)量規(guī)格:>95%
CD276 Others Mouse 小鼠 B7-H3 / CD276 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 6-氨基熒光素6-Aminofluorescein質(zhì)量規(guī)格:0.95
細(xì)胞角蛋白21-1片段免費(fèi)代測(cè)試劑盒說(shuō)明小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞,,Sol8細(xì)胞 S-180(腹水瘤細(xì)胞)Sulfo NHS SS Biotin質(zhì)量規(guī)格:BRSulfo NHS SS Biotin
腦瘤細(xì)胞;SF17四乙酰核糖(>98% (HPLC),BC)質(zhì)量規(guī)格:>98% (HPLC),BCTetraacetylribose
CST3 Others Mouse 小鼠 CST3 / Cystatin-C / Cystatin-3 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 硬脂酸鎂質(zhì)量規(guī)格:BRMagnesium stearate
大鼠紋狀體神經(jīng)元RN-s孔雀石綠鹽酸鹽(>90%,BS)質(zhì)量規(guī)格:>90%,BSMalachite green
CD14 Others Rat 大鼠 CD14 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 無(wú)水硫酸錳(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRManganese (II )sulfate anhydrous
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來(lái)自作為報(bào)告的酶。,,酶是一種有機(jī)催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。