支鏈α-酮酸脫氫酶(BCKDK)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品：IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 標(biāo)簽) Protein
Ⅹ(F10)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor X (F10)
EFNA4重組人 Ephrin-A4 / EFNA4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
ALOX5AP Protein Human 重組人

相關(guān)產(chǎn)品：

Ⅹ(F10)重組蛋白 Recombinant Coagulation Factor X (F10)

ALOX5AP Protein Human 重組人 ALOX5AP / FLAP 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL8重組人 IL-8 / CXCL8 蛋白 (aa 1-77, Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

EFNA4重組人 Ephrin-A4

僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Branched Chain Alpha-Ketoacid Dehydrogenase Kinase (BCKDK)

BCKDHKIN; 3-Methyl-2-Oxobutanoate Dehydrogenase/Lipoamide Kinase,Mitochondrial

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預(yù)測分子量：24.5kDa

實際分子量：24kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Arg44~Thr223 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：9.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

標(biāo)簽選擇：

親和標(biāo)簽：蛋白重組表達過程中采用親和標(biāo)簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶,。蛋白標(biāo)簽可分兩類：一類是短肽類標(biāo)簽；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達,。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來分析,。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的，大致步驟如下：

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白,；表達蛋白的分析、純化,、檢測

　　誘導(dǎo)表達成功后,，表達蛋白的分析、純化,、檢測應(yīng)該順當(dāng),，按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量,，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?；靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）,。

1、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液,，用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸,。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞,，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,，再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,，必需分裝成 50-100 萬細胞/管,，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當(dāng)減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解,。

2,、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘，取上清,，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作。

唇飾帶線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cheilospirura hamulosaPCR 50T

傳染性軟疣病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Molluscum Contagiosun Virus(MCV)PCR 50T

赤點石斑魚神經(jīng)壞死病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Redspotted  Grouper Nervous Necrosis Virus(RGNNV)RTPCR 50T

腸致病性大腸桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Enteropathogenic E.coli(EPEC)PCR 50

MRP3(Multidrug Resistanec-Associated Protein 3) 多藥耐藥相關(guān)蛋白3(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-CD38 CD38抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PACAP R1 腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體1抗體 規(guī)格 0.1ml

PCSK9 Kit Mouse 小鼠 PCSK9 ELISA配對抗體 ELISA

TNFAIP8L2 英文名稱： 壞死因子誘導(dǎo)蛋白8樣蛋白2/TNFα-IP 8L2抗體 0.1ml

COL6A5 英文名稱： 6型膠原蛋白α5抗體 0.2ml

Anti-CD38 CD38抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

支鏈α-酮酸脫氫酶(BCKDK)重組蛋白結(jié)核分枝桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Mycobacterium tuberculosis(MTB)PCR

杰米斯頓病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Germiston VirusRTPCR

節(jié)狀古柏線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Cooperia oncophoraPCR

節(jié)片代凡絳蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Davainea proglottinaPCR

注意事項：  

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,，應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2,、雖然作用溫和,，但能硬化組織，固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,，切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果,。因此,，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復(fù),，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。

4、本產(chǎn)品對人體有害,，操作時請小心,，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5,、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作