蛋白激酶R(PKR)活性蛋白的相關(guān)產(chǎn)品：IL18RAP重組食蟹猴 IL18RAP 蛋白 (His 標簽) Protein
midnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2(抗原 0.5mgmidnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2(抗原)
PI3重組人 PI3 / Elafin / WFDC14 蛋白 (His 標簽) Protein
ANGPTL4

標簽選擇：

親和標簽：蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用：一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,；另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類：一類是短肽類標簽,；一類是長肽以融合蛋白（fused partner）形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,，大致步驟如下：

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體和宿主細胞（常用的CHO和HEK293）

b.      表達載體的構(gòu)建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉(zhuǎn)染

e.      表達小試,，條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定（SDS-PGAE和WB）

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

僅供科研實驗產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Active Protein Kinase R (PKR)

PRKR; PRK-R; EIF2AK2; EIF2AK1; Eukaryotic Translation Initiation Factor 2 Alpha Kinase 2; Interferon-induced, double-stranded RNA-activated protein kinase; P1/eIF-2A kinase

酶與激酶 細胞凋亡 感染免疫

物種：Homo sapiens (Human,，人)

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 80%

等電點：8.9

應(yīng)用：Cell culture; Activity Assays.

規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg

相關(guān)產(chǎn)品：

midnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2(抗原 0.5mgmidnolin isoform Protein 2 中腦核仁蛋白2(抗原)

ANGPTL4 Protein Human 重組人 ANGPTL4 蛋白 (His 標簽)

IL18RAP重組食蟹猴 IL18RAP 蛋白 (His 標簽) Protein

FCRL1 Protein Mouse 重組小鼠 FCRL1 / FCRH1 蛋白 (His 標簽)

PI3重組人 PI3 / Elafin / WFDC14 蛋白 (Hi

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟：

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉(zhuǎn)化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,，蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶，則需要變復(fù)性來制備可溶蛋白,。

h.      鑒定,，包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白；表達蛋白的分析,、純化,、檢測

　　誘導表達成功后，表達蛋白的分析,、純化,、檢測應(yīng)該順當，按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。

操作步驟 ：

根據(jù)使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,，使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,。混勻備用（PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加）,。

1,、樣品前處理：

a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS,、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,，使裂解液和細胞充分接觸,。

b)對于懸浮細胞：離心收集細胞,，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,，再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,，必需分裝成 50-100 萬細胞/管,，然后再裂解。

c)對于組織樣品： 切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品,，可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,，直至充分裂解,。

2,、后處理：

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,，取上清,，即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作,。

高地病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Highlands J VirusJRTPCR 50T

鴿痘病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Pigeon Pox Virus（PPV）PCR 50T

弓形桿菌屬通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Arcobacter spp.PCR 50T

瓜納圖巴病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Guaratuba VirusRTPCR 50T

MMP-13 (Matrix metalloproteinase 13) 基質(zhì)金屬13抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

Anti-Angiopoietin 2 血管生成素2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Beta-Catenin(Ser45) 0酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

單組分TMB底物液 12ml/100ml 進口分裝

VSIG4 英文名稱： T淋巴細胞負調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.1ml

DLGAP2 英文名稱： PSD95結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml

Anti-Angiopoietin 2 血管生成素2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

蛋白激酶R(PKR)活性蛋白猴免疫缺陷病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Simian Immunodeficiency Virus(SIV)RTPCR

猴病毒PCR檢測試劑盒 英文名稱; Simian Virus 40(SV40)40PCR

紅色豬圓線蟲PCR檢測試劑盒 英文名稱; Hyostrongylus rubidusPCR

紅色毛癬菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Trichophyton rubrumPCR

注意事項：  

1,、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,，應(yīng)當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2,、雖然作用溫和,，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆,，切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,，使之不能充分暴露,，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果,。因此,，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復(fù)，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。

4,、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心,，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。

5、為了您的安全和健康,，請穿實驗服并戴一次性手套操作