詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,,在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果,。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素,;
③操作因素,。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù),!
產(chǎn)品名稱:生存素免費(fèi)代測(cè)試劑盒
英文名稱:survivin
檢測(cè)范圍:20pg/mL~640pg/mL
貨號(hào):YS-E987974
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個(gè)月,,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,,試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品等。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個(gè)標(biāo)本-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-84個(gè)樣本
48T指可以做47個(gè)標(biāo)本-1個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照-42個(gè)樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
試劑盒種屬:馬鈴薯,、鹿、羊,、雞,、鴨、魚,、人,、大鼠、小鼠,、豚鼠,、倉鼠、裸鼠,、兔子,、豬、犬,、猴,、馬、牛等動(dòng)植物,。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個(gè) |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
2400 ng/L | 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次,。
2,、自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中,。
3,、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測(cè)效果,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,,不能混用其他商的產(chǎn)品,。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果。
4,、在儲(chǔ)存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果,。
5、濃洗滌液會(huì)有鹽析出,,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,。
6、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì),,此為正?,F(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響,。
7,、所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置,。
8,、有效期:6個(gè)月。
大鼠肝細(xì)胞瘤;H-4-II-EN-乙酰-D-色酸100克
SFPAC-1細(xì)胞,,胰腺癌細(xì)胞 舌癌細(xì)胞系,Tca8113-P60細(xì)胞 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-D2α-溴代-γ-丁內(nèi)酯 2-Bromo-4-butcnolidq 2061-1-
J82(膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2乙酰輔酶A25克
Promocell C-21070 Small Airway Epithelial CellGrowth Medium, 小呼吸道上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml鹽酸奈乙二安5克
腦膜細(xì)胞裂解物HMCL.6-二甲基2,6-Lutidine
肺粘液上皮樣癌細(xì)胞;NCI-H292甘油三油酸醋,,英文名或英文縮寫:Glycerol trioleate,,級(jí)別:BR,97%,,規(guī)格:5克
NK-92MI細(xì)胞,惡性非霍奇金瘤患者的自然殺傷細(xì)胞 表達(dá)HBV病毒的肝細(xì)胞,HepG2.2.15細(xì)胞 CL-0192RBL-2H3(大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2流醋本安 cnilinq sulfctq 24-16-2
敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21CASPASE-3INHIBITORVIICASPASE-3 抑制劑 VII試劑級(jí)米白色固體COLDsigma
KIRREL Others Mouse 小鼠 KIRREL1 / NEPH1 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 2,9-二甲基鄰啰啉,,英文名或英文縮寫:Neocuproine,,級(jí)別:CP,99%,,規(guī)格:50克
角臘上皮細(xì)胞生長添加物CEpiCGS(蛋白酶抑制劑)
IL12B Others Human IL12B / P40 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 正十五烷(標(biāo)準(zhǔn)品)N-PENTADECANE質(zhì)量規(guī)格:內(nèi)標(biāo)
豬細(xì)胞;ST咖啡酸乙酯(標(biāo)準(zhǔn)品)ETHYL CAFFEATE質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 檸檬酸無水Citric acid質(zhì)量規(guī)格:>99%,AR
氣管平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL檸檬酸無水(標(biāo)準(zhǔn)品)Citric acid質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
OCM-1A細(xì)胞,,低侵襲性脈絡(luò)膜色素素瘤細(xì)胞 綠色木霉 小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞;DCS硫酸鉀(標(biāo)準(zhǔn)品)Potassium sulfate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
生存素免費(fèi)代測(cè)試劑盒CLU Others Human CLU / Clusterin 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氘代鹽酸(50g)Deuterium Chloride質(zhì)量規(guī)格:D, 99.5% DCL 35% IN D2O
成纖維細(xì)胞RNAHLF miRNA5 μg1酸-d3(100g )Phosphoric Acid-D3 (D, 99%)質(zhì)量規(guī)格:D,99%
F13B Others Human F13B / Coagulation factor XIII B chain 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氘代苯-D6(0.6ml x 10 )Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%+0.05%TMS
U251 神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞氘代苯-D6(0.5ml x 10 )Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%
CL-0426RKO-E6(結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞)5×106cells/瓶×2氘代苯-D6(0.55ml x 10)Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%+0.03%TMS
使用方法:
測(cè)定法的靈敏度來自作為報(bào)告的酶。,,酶是一種有機(jī)催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋,。 24μg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值),。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。