詳細介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定,。 但ELISA測定中影響因素較多,,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,,有時常見到一些錯誤的結(jié)果,。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素,;
③操作因素,。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù),!
產(chǎn)品名稱:鋅指蛋白36免費代測試劑盒說明
英文名稱:Zinc Finger Protein 36
檢測范圍:20pg/mL~640pg/mL
貨號:YS-E988185
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分:酶標板,,試劑,標準品等,。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標本-2個標準對照-84個樣本
48T指可以做47個標本-1個標準對照-42個樣本
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主要成分:酶標板,試劑,標準品等,。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿,、羊,、雞、鴨,、魚,、人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、倉鼠,、裸鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛等動植物,。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標準品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
2400 ng/L | 5 號標準品 | 150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標準品 | 150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標準品 | 150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標準品 | 150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標準品 | 150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液 |
實驗注意事項:
1,、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標板朝下用力拍幾次,;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,,重復(fù)此過程數(shù)次,。
2、自動洗板:如果有自動洗板機,,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中,。
3、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,,因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的,,不能混用其他商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果,。
4,、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,,試劑避免受到微生物的污染,,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
5,、濃洗滌液會有鹽析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
6,、剛開啟的酶標板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),,此為正常現(xiàn)象,,不會對實驗結(jié)果造成任何影響,。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
8、有效期:6個月,。
微血管內(nèi)皮細胞RNAHDMEC miRNA5 μgβ-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 3'-1酸鈉鹽水合物質(zhì)量規(guī)格:美國進口β-Nicotinamide adenine dinucleotide 3'-phosphate salt hydrate
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 細胞裂解液 (陽性對照) 腺嘌呤鹽酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口Adenine
家兔腎細胞;RABK3硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口Thionicotinamide adenine dinucleotide
HIC細胞,,小腸癌細胞系 熒光素酶轉(zhuǎn)染成骨肉瘤細胞,U2OS-Luc teT-on細胞 結(jié)直腸腺癌細胞;LS 174T [LS174T](R)-9-[2-(二乙基1酰基甲氧基)丙基]腺嘌呤質(zhì)量規(guī)格:美國進口(R)-9-[2-(Diethylphosphonomethoxy)propyl] Adenine
HL-60(早幼粒急性白血病細胞) 5×106cells/瓶×27-二去甲基米諾環(huán)素二鹽酸質(zhì)量規(guī)格:美國進口7-Didemethyl Minocycline Di
HuT 78(T細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2蘋果酸脫氫酶測試盒(測組織)100支/包
6T-CEM (T細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H075腎足突細胞*培養(yǎng)基100mL 結(jié)膜成纖維細胞RNAHConF miRNA5 μg四氮坐醋 1H-Tqtrczolq-1-ccqtic ccid 173-17-
CM-R063大鼠腎小球內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL血清兔抗IgG,,F(ab)21公斤RT
EPHA3 Others Mouse 小鼠 EphA3 (aa 569-984) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) TG-SDS-BUFFER,10XREADY-PACKTG-SDS緩沖液, 干粉蛋白組學(xué)級白色粉末RTsigma
大鼠小腦星形膠質(zhì)細胞RA-c4-溴-1-硝基本1-Bromo-4-nitnobenzene
CGB5 Others Human CGB5 細胞裂解液 (陽性對照) 莫索尼定Moxonidine 質(zhì)量規(guī)格:度>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
家兔骨髓間充質(zhì)干細胞;2012083MSC莫索尼定(標準品)Moxonidine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品
二氫葉酸還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr- 食管癌細胞,,TE-11細胞 B82細胞,鼠細胞系奈帕芬胺Nepafenac質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
B16-F10, 小鼠色素瘤高轉(zhuǎn)移細胞 Mouse奈帕芬胺(標準品)Nepafenac質(zhì)量規(guī)格:>99%,標準品
SOST Others Rat 大鼠 SOST / Sclerostin 細胞裂解液 (陽性對照) 尼卡巴嗪 Nicarbazin 質(zhì)量規(guī)格:>98%
鋅指蛋白36免費代測試劑盒說明LRG1 Others Human LRG1 細胞裂解液 (陽性對照) 并五苯(以升華法化)Pentacene (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格:
眼晶狀體上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)顏料藍 15(以升華法化)Pigment Blue 15 (purified by sublimation)質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)
Jurkat E6-1細胞,,T細胞瘤 癌細胞,4T1細胞 上皮細胞生長添加物-2EpiCGS-21,2-(standard for GC, ≥99.5% (GC))1,2-Propanediol質(zhì)量規(guī)格:standard for GC, ≥99.5% (GC)
水牛皮膚成纖維樣細胞;WB-S2正十二烷基苯(analytical standard,≥99.5%(GC))1-Phenyldodecane質(zhì)量規(guī)格:analytical standard,≥99.5%(GC)
IL1RN Others Human IL1RA / IL1F3 細胞裂解液 (陽性對照) 2-苯乙醇(GC,>99.5%(GC))2-Phenylethanol質(zhì)量規(guī)格:GC,>99.5%(GC)
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。,酶是一種有機催化劑,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系。
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。 24μg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
12μg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
6μg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
3μg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
1.5μg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。