僅供科研實驗產品屬性:
產品名稱 | 物種 | 性狀 | 來源 |
胸苷酸合成酶(TYMS)活性蛋白 | Homo sapiens (Human,人) | 凍干粉 | 原核表達 |
英文名稱:Active Thymidylate Synthetase (TYMS)
TS; TMS; TSase; Thymidylate Synthase
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點:6.8
應用:Cell culture; Activity Assays.
規(guī)格10μg 50μg 200μg 1mg 5mg
標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易,;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽,;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達,。使用不同的蛋白標簽需要根據具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構建
c. 無內毒素的質粒抽提
d. 細胞瞬時轉染
e. 表達小試,,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,,則需要變復性來制備可溶蛋白,。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白,;表達蛋白的分析,、純化、檢測
誘導表達成功后,,表達蛋白的分析,、純化、檢測應該順當,,按一般的實驗步驟做沒太大的問題,。

注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間,。
2、雖然作用溫和,,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,,切片時易碎,。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3,、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,,使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,,使之不能充分暴露,,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果,。因此,,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作,。
4,、本產品對人體有害,操作時請小心,,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內,。
5、為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作
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ED
操作步驟 :
根據使用量,,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM,?;靹騻溆茫?span>PMSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1,、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍,。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸,。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,,再用手指輕彈以充分裂解細胞,。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 切成細小的碎片,。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,,可以適當減少裂解液的用量),。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解,。
2,、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定,、SDS-PAGE,、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
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綿羊皰疹病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Ovine Herpesvirus 1(OHV2)1PCR 50T
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Anti-Angiopoietin 1 血管生成素-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-Beta-catenin(Tyr86) 0酸化β 連環(huán)素蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
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DLGAP4 英文名稱: PSD95結合蛋白4抗體 0.2ml
Anti-Angiopoietin 1 血管生成素-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
胸苷酸合成酶(TYMS)活性蛋白副溶血嗜血桿菌PCR檢測試劑盒 英文名稱; Haemophilus parahemolyticusPCR
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副流感病毒型PCR檢測試劑盒 英文名稱; Parainfluenza Virus 5(PIV5)5PCR
副流感病毒通用PCR檢測試劑盒 英文名稱; Parainfluenza Virus(PIV)RTPCR