詳細(xì)介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定,。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素,;
②試劑因素,;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱:細(xì)胞周期素D1免費(fèi)代測試劑盒規(guī)格
英文名稱:Cyclin-D1
檢測范圍:12.5pg/mL~400pg/mL
貨號:YS-E988152
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,,所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本-2個標(biāo)準(zhǔn)對照-84個樣本
48T指可以做47個標(biāo)本-1個標(biāo)準(zhǔn)對照-42個樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
試劑盒種屬:馬鈴薯、鹿,、羊,、雞、鴨,、魚,、人、大鼠,、小鼠,、豚鼠、倉鼠,、裸鼠,、兔子、豬,、犬,、猴、馬,、牛等動植物,。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水,、灌洗液,、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1,、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,;在實(shí)驗(yàn)臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次,。
2,、自動洗板:如果有自動洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中,。
3,、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的,,不能混用其他商的產(chǎn)品,。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果。
4,、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果,。
5、濃洗滌液會有鹽析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
6,、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),,此為正常現(xiàn)象,,不會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響,。
7、所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置,。
8、有效期:6個月,。
侵襲性脈絡(luò)膜色素瘤細(xì)胞;MuM-2C 大鼠內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL馬尿酸鈉培養(yǎng)基100克
M1 小鼠白血病細(xì)胞俾氏麥棕Y Biological stain 10114-58-6 25G 通用試劑
PLA2G7 Others Human PLA2G7 / PAFAH 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 炳1醋羌炳酯 xy7noxypropyl ccrylctq 2284-83-
胚胎肌肉組織來源細(xì)胞;CCC-HSM-2草酸鈉,,英文名或英文縮寫:wo7ium oxamate,級別:BR,,98%,,規(guī)格:25克
FUT8 Others Human FUT8 (aa 68-575) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) PectolaseY-23 100mg/500mg/1g/10g原裝 Yakult.JAPAN
COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細(xì)胞碳酸5克
EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞;KM9401 血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL固紅RC Diazo Red RC 68025-25-2 25G 通用試劑
非必需氨基酸 100XNEAA言醋伊立替康 Irinotqccn xy7nochloridq 13627-09-3
MAP2K4 Others Mouse 小鼠 MKK4 / MEK4 / MAP2K4 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氧化釔100毫克
小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H44658812-37-6川楝素Toosendanin
EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸苯海拉明Diphenhydramine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12]鹽酸苯海拉明(標(biāo)準(zhǔn)品)Diphenhydramine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
MRC-5細(xì)胞,胚肺細(xì)胞 大鼠肺上皮Ⅱ型細(xì)胞,RLE-6TN細(xì)胞 T-109B彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL聚肌苷酸Polyinosinic acid質(zhì)量規(guī)格:≥90.0%,BR
SK-OV-3(卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2米屈肼Mildronate,Meldonium質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,二水合物
HUVEC-c Growth Medium 2 pooled 500,000cells 肺大靜脈平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)米屈肼(標(biāo)準(zhǔn)品)Mildronate,Meldonium質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
細(xì)胞周期素D1免費(fèi)代測試劑盒規(guī)格CD53 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD53 (aa 107-181) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 阿替美唑鹽酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Atipamezole HCl質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠骨髓細(xì)胞;FDC-P1阿糖胞苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Cytarabine質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
LM-6細(xì)胞,,肝癌細(xì)胞系 小鼠白血病細(xì)胞,L1210細(xì)胞 兔主動脈平滑肌細(xì)胞;SMC達(dá)卡巴嗪Dacarbazine質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,USP31,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
MA-782(小鼠癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2達(dá)卡巴嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)Dacarbazine質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Promocell C-22062 Smooth Muscle Cell GrowthMedium 2,, 平滑肌細(xì)胞生長培養(yǎng)基2型(即用型) 500ml達(dá)沙替尼(無水)Dasatinib質(zhì)量規(guī)格:含量>99.0%,,無水
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶,。,酶是一種有機(jī)催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),,產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。