詳細介紹
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定,。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,,在檢測過程中除正常反應(yīng)外,,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素,;
②試劑因素,;
③操作因素。在實驗過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作,,必能得出準(zhǔn)確的實驗結(jié)果,,可提供免費技術(shù)咨詢服務(wù)!
產(chǎn)品名稱:生長激素結(jié)合蛋白免費代測試劑盒規(guī)格
英文名稱:growth hormone binding protein
檢測范圍:31.25pg/mL~1000pg/mL
貨號:YS-E987982
?保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:6個月,,所有試劑盒均提供批次,。
試劑盒成分:酶標(biāo)板,試劑,,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
選型:
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
96T指可以做94個標(biāo)本-2個標(biāo)準(zhǔn)對照-84個樣本
48T指可以做47個標(biāo)本-1個標(biāo)準(zhǔn)對照-42個樣本
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等。
試劑盒種屬:馬鈴薯,、鹿,、羊、雞,、鴨、魚,、人,、大鼠,、小鼠、豚鼠,、倉鼠,、裸鼠、兔子,、豬,、犬、猴,、馬,、牛等動植物。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測包括血清、血漿,、尿液,、胸腹水、灌洗液,、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..
試劑盒組成:
1 | 20 倍濃縮洗滌液 | 30ml×1 瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1 瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1 瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(270ng/L) | 0.5ml×1 瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12 孔×8 條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1 瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1 瓶 | 10 | 說明書 | 1 份 |
5 | 顯色劑 A 液 | 6ml×1 瓶 | 11 | 封板膜 | 2 張 |
6 | 顯色劑 B 液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1 個 |
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,,提取按相關(guān)文獻進行,,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,,可將標(biāo)本放于-20℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。
2400 ng/L | 5 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1200ng/L | 4 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
600ng/L | 3 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
300ng/L | 2 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
150ng/L | 1 號標(biāo)準(zhǔn)品 | 150µl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150µl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
實驗注意事項:
1、手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),,浸泡1-2分鐘,,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次,。
2,、自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。
3,、只有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果,,因為所有試劑都是有關(guān)聯(lián)的,不能混用其他商的產(chǎn)品,。只有嚴(yán)格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會得到的檢測結(jié)果,。
4、在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中,。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果,。
5,、濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,。
6,、剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
7,、所有的樣品都應(yīng)管理好,,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8,、有效期:6個月,。
大鼠尿道上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL鈧氧,英文名或英文縮寫:Scandium oxide,,級別:BR,,98%,規(guī)格:100克
SHZ-88大鼠癌細胞 Breast cancer cells of SHZ-88 rats DMEM培養(yǎng)基+10%FBS典化銨;典化铔 cMMoniuM iodidq 107-06-4
IGFBP4 Protein Mouse 重組小鼠 IGFBP4 蛋白 (His 標(biāo)簽)馬尿酰-組酰-亮酸,,英文名或英文縮寫:N-Hippuryl-His-Leu hydrate,,級別:BR,98%,,規(guī)格:25克
Hep B1.2(肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2 痢疾志賀氏菌1,1,2-三扶-1,2,2-三錄,,英文名或英文縮寫:1,1,2-Trichlorotrifluoroethane,級別:CP,,99.5%,,規(guī)格:1公斤
氣道平滑肌細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)Bilesalt 25g/1kg 國產(chǎn)
CD320 Others Mouse 小鼠 CD320 / 8D6A 細胞裂解液 (陽性對照) DIetxylPYROcaonaTE(DEPC)焦碳酸二乙酯(液體)高級5G1609-47-8COLD
骨肉瘤細胞;HOS本安;啊泥林;啊泥林油;安基本 cnilinq;cMinobqnzqnq;PhqnylcMinq 6-23-3
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12 [PC12] T細胞白血病細胞,HuT78細胞 Mv.1.Lu(NBL-7)細胞,,貂肺上皮細胞Neutralred堿性紅51克超,,99%
SKOV3 [SK-OV-3], 卵巢癌腺癌細胞系 Human青霉素鏈霉素兩性霉素B溶液,,英文名或英文縮寫:Penicillin&Streptomycin&Amphotericin B solution,γ-Irradiated,級別:高,,90%,,適合電泳,,規(guī)格:750U
LCN1 Others Human LCN1 / VEGP / Lipocalin-1 細胞裂解液 (陽性對照) 霧抑制劑Chromium-fog inhibitor
CCL28 Protein Human 重組 CCL28 蛋白 (His 標(biāo)簽)正十三烷基-beta-D-麥牙糖苷(>98%,BC)n-Tridecyl-b-D-maltopyranoside (e)質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細胞) 5×106cells/瓶×2 Cardioophin-1 / CTF1 細胞裂解液 (陽性對照) 辛二酸(>98%,BR)Octanedioic acid質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
豬腎細胞;PK(15)橄欖油Olive oil質(zhì)量規(guī)格:商品級
TGFB1 Others Rat 大鼠 TGF-beta 1 / TGFB1 細胞裂解液 (陽性對照) 鄰甲氧基肉桂醛(>98%,BR)o-Methoxycinnamaldehyde質(zhì)量規(guī)格:>98%,,BR
神經(jīng)小膠質(zhì)細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)苔紅素(合成)Orcein, synthetic質(zhì)量規(guī)格:BS
生長激素結(jié)合蛋白免費代測試劑盒規(guī)格星形膠質(zhì)細胞氘代苯-D6(10g )Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%
胚肺二倍體細胞;HL 小腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL氘代苯-D6(10g )Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%+0.03%TMS
類原巨核細胞型白血病細胞;UT-7氘代苯-D6(25g)Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%
LAG3 Others Rat 大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 細胞裂解液 (陽性對照) 氘代苯-D6(50g)Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%
CM-R026大鼠骨髓基質(zhì)細胞*培養(yǎng)基100mL氘代苯-D6(100g )Benzene-D6質(zhì)量規(guī)格:D,99.5%
使用方法:
測定法的靈敏度來自作為報告的酶。,,酶是一種有機催化劑,,很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng),產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象,。因此該體系常被稱為酶放大體系,。
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。 24μg/ml 5號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
12μg/ml 4號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
6μg/ml 3號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
3μg/ml 2號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5μg/ml 1號標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2. 加樣:分別設(shè)空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。|
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。