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CRP/PTX1 馬C反應蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒說明書

閱讀:87          發(fā)布時間:2022-9-23
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                    CRP/PTX1 馬C反應蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒說明書


實驗原理:


試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中17-OHP 表達。用純化的17-OHP 抗體包被微孔板,,制成固相抗體,,可與樣品中17-OHP 相結合,經(jīng)洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與 HRP 標記的17-OHP 抗體結合,,形成抗體 抗原 酶標抗體復合物,,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色,,并在酸的作用下轉化成最終的黃色,。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),與 CUTOFF 值相比較,,從而判定標本中17-OHP 的存在與否,。


樣本要求:


1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,,提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,可將標本放于20℃保存,,但應避免反復凍融


2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性,。

操作程序:



 CRP/PTX1 馬C反應蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:


1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,,每板應設陰性對照 2 孔,、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,,其余各步操作相同)


2. 加樣:分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50%l,。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40%l,,然后再加待測樣品 10%l。加樣將樣品加 于酶標板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,


3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。


4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用


5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置 30 秒后棄去,如此重復 5 次,,拍干,。


6. 加酶:每孔加入酶標試劑 50%l,空白孔除外,。


7. 溫育:操作同 3,。


8. 洗滌:操作同 5。


9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50%l,,再加入顯色劑 B50%l,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.

10. 終止:每孔加終止液 50%l,,終止反應(此時藍色立轉黃色),。


11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值),。 測定應在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進行,。


 CRP/PTX1 馬C反應蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒注意事項:


1. 操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用,。


2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 1530 分鐘后方可使用,,酶標包被板開封后如未


用完,板條應裝入密封袋中保存,。


3.濃洗滌液可能會有結晶析出,,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果,。


4. 封板膜只限一次性使用,,以避免交叉污染,。


5.底物請避光保存。


6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,,使用雙波長檢測時,,參考波長為 630nm


7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。終止液為 2M 的硫酸,,使用時必須注意安全。


 CRP/PTX1 馬C反應蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒保存條件及有效期:


1. 試劑盒保存:,;28℃,。


2.有效期:6 個月


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