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人C型鈉尿肽（CNP）酶聯(lián)免疫分析試劑盒產品使用
閱讀：135 發(fā)布時間：2018-6-26| 提 供 商 | 上海研生實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 140.1KB |
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| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數 | 135次 |
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人C型鈉尿肽（CNP）酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人C型鈉尿肽(CNP)水平,。用純化的人C型鈉尿肽(CNP)抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入C型鈉尿肽(CNP),，再與HRP標記的C型鈉尿肽(CNP)抗體結合,，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的C型鈉尿肽(CNP)呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人C型鈉尿肽(CNP)濃度,。
試劑盒組成
1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1瓶
7
終止液
6ml×1瓶
2
酶標試劑
6ml×1瓶
8
標準品（16pg/ml）
0.5ml×1瓶
3
酶標包被板
12孔×8條
9
標準品稀釋液
1.5ml×1瓶
4
樣品稀釋液
6ml×1瓶
10
說明書
1份
5
顯色劑A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2張
6
顯色劑B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1個
標本要求
1．標本采集后盡早進行提取,，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗,，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性,。
人C型鈉尿肽（CNP）酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟
標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。
8pg/ml
5號標準品
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
4pg/ml
4號標準品
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
2pg/ml
3號標準品
150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
1pg/ml
2號標準品
150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
0.5pg/ml
1號標準品
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）,、標準孔、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）,。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復5次,，拍干。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl,，空白孔除外,。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5,。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
測定：以空白空調零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
計算
以標準物的濃度為橫坐標,，OD值為縱坐標,，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度,；再乘以稀釋倍數,；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度,，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度,。
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器,，并經常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,，如標本數量多,，推薦使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔,。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）,。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存,。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,，以英文說明書為準,。
人C型鈉尿肽（CNP）酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃,。
2．有效期：6個月