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轉(zhuǎn)基因構(gòu)建OTP增強子-CrylA基因PCR試劑盒反應的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,；

②堿基配對原則,；

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性,；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關鍵,。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的,。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,，使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加,，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度,。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高,。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞,；在病毒的檢測中,，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中小檢出率為3個細菌,。

(3) 簡便,、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后,，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,，不一定要用同位素,，無放射性污染、易推廣,。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液,、體腔液、洗嗽液,、毛發(fā),、細胞、活PCR技術(shù)概論,。