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小鼠抗凝血酶受體(ATR)elisa試劑盒?操作步驟
閱讀:87 發(fā)布時間:2024-1-91.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,,每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔,、陽性對照 2 孔,、空白對照 1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照 50µl,。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,,如此 重復(fù) 5 次,,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,,空白孔除外,。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,,再加入顯色劑 B50µl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11.測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值),。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進行。