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新生隱球菌PCR試劑盒使用方法：

一,、樣品采集：

1,、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行,。

2,、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻,。

3,、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。

4,、病灶部位樣品：取發(fā)病部位新鮮滲出物,、粘液膿血送檢。

一,、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）

1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,，分別為 7,，6，5,，4,，3，2,。

3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（最好用帶芯槍頭,，下同）。

4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,，充分震蕩 1 分鐘,，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用,。

5. 換槍頭,，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用

6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。