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人S100A11鈣結合蛋白?操作步驟
閱讀:126 發(fā)布時間:2021-12-8人S100A11鈣結合蛋白操作步驟:
從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL,;
待測樣本孔先加待測樣本10μL,,再加樣本稀釋液40μL;
隨后標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板),。
每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。
每孔加入終止液50μL,,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值,。
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值,。
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