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ConA elisa酶聯(lián)免疫試劑盒雙抗體夾心法:
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg/ml,。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜,。次日,，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次,，每次3分鐘,。（簡稱洗滌,，下同）,。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時,。然后洗滌,。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）,。
3. 加酶標抗體：于各反應孔中,，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經滴定后的稀釋度）0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時,，洗滌,。
4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘,。
5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml,。
6. 結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深,，陽性程度越強,，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”,、“-”號表示,。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色,，則410nm）處,，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,，即為陽性,。

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