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人主要組織相容性復合體Ⅰ類 MHCⅠ/HLAⅠELISA試劑盒的間接法：
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml,，每孔加0.1ml,，4℃過夜,。
 
2.次日洗滌3次。
 
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌,。(同時做空白,、陰性及陽性孔對照)于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,，37℃孵育30-60分鐘,，洗滌,最后一遍用DDW洗滌。
 
4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃10～30分鐘,。
 
5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml,。
 
6. 結果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強,，陰性反應為無色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”,、“-”號表示,。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色,，則410nm)處,，以空白對照孔調零后測各孔O·D值,，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性,。
雙抗原夾心法檢測抗體
雙抗原夾心法的反應模式與雙抗體夾心法類似,。用特異性抗原進行包被和制備酶結合物，以檢測相應的抗體,。與間接法測抗體的不同之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體,。此法中受檢標本不需稀釋，可直接用于測定,，因此其敏感度相對高于間接法,。乙肝標志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關鍵在于酶標抗原的制備,，應根據(jù)抗原結構的不同,，尋找合適的標記方法。

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