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ZDNA結(jié)合蛋白1檢測(cè)試劑盒驗(yàn)步驟及實(shí)驗(yàn)流程
閱讀:397 發(fā)布時(shí)間:2021-3-29ZDNA結(jié)合蛋白1檢測(cè)試劑盒驗(yàn)步驟:
1.從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;3.待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,,再加樣本稀釋液40μL;
4.隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液,靜置1min,,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。
6.每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。
7.每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值,。
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品,、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,,37°C孵育1小時(shí),;
3. 吸棄,加檢測(cè)溶液A100µL,,37°C孵育1小時(shí),;
4. 洗板3次;
5. 加檢測(cè)溶液B100µL,,37°C孵育30分鐘,;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,,37°C孵育10-20分鐘,;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù),。
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