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類志賀鄰單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒應(yīng)用案例

閱讀:157          發(fā)布時(shí)間:2021-3-1

類志賀鄰單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒應(yīng)用案例:

樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容,。,。也可以選購(gòu)本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout,。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分),。
稀釋陽性對(duì)照(以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例,。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,,只提供可以直接使用的長(zhǎng)為 86bp 的 DNA 段作為陽性對(duì)照,。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,,6,,5,4,,3,,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同),。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,,充分震蕩 1 分鐘,,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用,。5.換槍頭,,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,。放冰上待用。
6.換槍頭,,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中,,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用,。
7.換槍頭,,在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 4 號(hào)管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對(duì)照,。放冰上待用,。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用,。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20  μL 體系,,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分。
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