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17-KS elisa酶聯(lián)免疫試劑盒的間接法:
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml,，每孔加0.1ml，4℃過夜,。
 
2.次日洗滌3次,。
 
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白,、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘,，洗滌,后一遍用DDW洗滌,。
 
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘,。
 
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。
 
6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,，陽性程度越強(qiáng),，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺,，以“+”、“-”號(hào)表示,。也可測(cè)O·D值：在ELISA檢測(cè)儀上,，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處,，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值,，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性,。試劑使用須知：
（1）請(qǐng)參照相關(guān)法規(guī),、文獻(xiàn)、MSDS等信息,，理解并掌握好試劑的特性,，再進(jìn)行安全操作。
（2）通常購買試劑時(shí)一定要想到一次性用完,。若估算不足有剩余的話,，更加注意其他保管和管理。
（3）萬一試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員,。必須在專業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進(jìn)行操作,。對(duì)于使用后的廢棄物，不要或者舊的試劑,，應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理,。
（4）購買后,，請(qǐng)務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)；做好預(yù)防顛倒,，摔壞的措施和管理體制,；在使用前再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)，做好必要的安全對(duì)策,；對(duì)沒有標(biāo)明其危害特性,、有害特性的，也要慎重地進(jìn)行操作,；必須帶好防護(hù)用具,，小心翼翼進(jìn)行操作。