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大鼠神經(jīng)生長因子（NGF）elisa試劑盒實驗操作步驟：
1. 取出試劑盒,，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板,，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準 品組（6 個濃度）,、空白孔,、待測樣品組。 注：為減少實驗誤差,，保證準確性,，建議設(shè)置復(fù)孔。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中,；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本,。
4. 加酶標溶液：標準品組,、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后,，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時,。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s,，充分清洗酶標板 5 次,，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后,，再加入顯色劑 B 液 50ul,。
8. 終止：25-37℃下避光反應(yīng) 10-15 分鐘,，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值,。 

實驗材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標儀（使用前預(yù)熱30分鐘）,，微量加液器、吸頭,、蒸餾水或去離子水,，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中,，如果樣品量不夠或者不確定,，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻,，靜置1小時備用（如果標本是血清或者血漿,，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用,。

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