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技術(shù)文章

考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒樣本實驗前準備

閱讀:243          發(fā)布時間:2020-11-12

考馬斯亮藍法蛋白含量測試盒樣本實驗前準備
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等,。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心,。
(3)尿液:
用無菌管收集,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。胸腹水、腦脊液參照此實行,。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清,。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,,細胞濃度達到100萬/ml左右,。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,,應(yīng)再次離心,。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量,。加入一定量的PBS,,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度,。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化,。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,,其余冷凍備用,。

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