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技術(shù)文章

金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒樣本處理及要求

閱讀:259          發(fā)布時(shí)間:2019-6-5

金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),。往預(yù)先包被金屬硫蛋白(MT)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本,、標(biāo)準(zhǔn)品,、HRP標(biāo)記的檢測抗體,,經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯色,,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的金屬硫蛋白(MT)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度,。

金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒樣本處理及要求

1.  血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.  血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
3.  細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,。
注:標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測,。

需要而未提供的試劑和器材

1.     酶標(biāo)儀(450nm)

2.     高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL,、2-20uL,、20-200uL、200-1000uL

3.     37℃恒溫箱

4.     蒸餾水或去離子水

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