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       目前，免疫學(xué)檢驗(yàn)中的標(biāo)記技術(shù)主要包括酶免疫技術(shù),、熒光免疫技術(shù),、放射免疫技術(shù)、金免疫技術(shù),、化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)等,。其中酶免疫技術(shù)是以酶標(biāo)記的抗體（抗原）作為主要試劑，將抗原抗體反應(yīng)的特異性和酶催化底物反應(yīng)的性和專(zhuān)一性結(jié)合起來(lái)的一種免疫檢測(cè)技術(shù),。作為經(jīng)典的三大標(biāo)記技術(shù)之一,，酶免疫技術(shù)在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中得到廣泛應(yīng)用并不斷得到更新。

一,、常用的酶及顯色底物

　　在酶免疫技術(shù)中用于標(biāo)記的酶應(yīng)具有催化活性高,、催化專(zhuān)一性強(qiáng)；與抗原抗體偶聯(lián)后不影響抗原抗體的免疫反應(yīng)性和酶活性,；催化的底物易于配制,、保存且催化底物產(chǎn)生的信號(hào)產(chǎn)物易于觀察和檢測(cè)；對(duì)人無(wú)害且價(jià)廉,、易得等特點(diǎn),，目前常用的酶及底物見(jiàn)表1。

表1 常用酶及底物

常用酶 底物 加終止液前顏色 加終止液后顏色

辣根過(guò)氧化物酶（HRP） 鄰苯二胺（OPD） 橙黃色 棕黃色

RZ>3.1 四甲基聯(lián)苯胺（TMB） 藍(lán)色 黃色

堿性磷酸酶（AP） 對(duì)硝基苯磷酸酯（p-NPP） 黃色 黃色

二,、標(biāo)記物的制備

　　在酶免疫技術(shù)中制備標(biāo)記物的抗原應(yīng)純度高,、抗原性完整；制備標(biāo)記物的抗體應(yīng)特異性好,、效價(jià)高,、親和力強(qiáng)、比活性高、能批量和易于分離純化,。

　　制備酶標(biāo)記物的方法應(yīng)符合簡(jiǎn)單,、產(chǎn)量高；避免酶,、抗體（抗原）,、酶標(biāo)記物各自形成聚合物；標(biāo)記反應(yīng)不影響酶的活性和抗原抗體的免疫反應(yīng)性等原則,。標(biāo)記物制備的方法基本屬于兩類(lèi)：

（一） 交聯(lián)法

　　交聯(lián)法是以一可同時(shí)與酶和抗體（抗原）結(jié)合的 交聯(lián)劑作為“橋”,，分別連接酶與抗體（抗原）的方法，此類(lèi)方法中目前zui常用的是戊二醛交聯(lián)法,，形成的結(jié)合物為：酶-戊二醛-抗體（抗原）

（二） 直接法

　　直接法是用一活化劑首先將酶活化,，被活化的酶分子上的基團(tuán)直接可與抗體（抗原）結(jié)合形成標(biāo)記物，如過(guò)碘酸鈉法,。形成的結(jié)合物為：酶-抗體（抗原）,。

三、酶免疫技術(shù)類(lèi)型

　　酶免疫技術(shù)按照抗原抗體系統(tǒng)是定位于組織細(xì)胞上還是存在于液體樣品中分為酶免疫組化技術(shù)和酶免疫測(cè)定（EIA）,，酶免疫測(cè)定又可分為均相酶免疫測(cè)定和異相酶免疫測(cè)定,。