技術(shù)文章
小鼠elisa檢測試劑盒標(biāo)準(zhǔn)操作要點
閱讀:426 發(fā)布時間:2018-11-15小鼠elisa檢測試劑盒無論在什么研究中,,的試劑、良好的和正確的操作是保證ELISA 檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件,。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的純化水電導(dǎo)率小于1.5μs/cm,。
A 標(biāo)本的采取和保存
大部分ELISA 檢測均以血清為標(biāo)本,。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,,紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),,以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色,。血清標(biāo)本宜在新鮮時檢測,。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,,也會產(chǎn)生假陽性反應(yīng),。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標(biāo)本可放置于4℃,,標(biāo)本在冰箱中保存時間過長導(dǎo)致血清IgG聚合,,使間接法的試劑本底加深。超過一周測定的需-20℃保存,。凍結(jié)血清融解后,,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,,應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡,。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過濾,,澄清后再檢測,。反復(fù)凍融會使抗體效價跌落,所以測抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測,,宜少量分裝冰存,。保存血清自采集時就應(yīng)注意無菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑,??鼓?的標(biāo)本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽性,建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑,。
B 加樣
加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,。