技術(shù)文章
影響大鼠elisa檢測(cè)試劑盒檢測(cè)的質(zhì)量原因
閱讀:348 發(fā)布時(shí)間:2018-10-30大鼠elisa檢測(cè)試劑盒質(zhì)量保證是一個(gè)復(fù)雜的過程,,許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測(cè)的質(zhì)量,。在實(shí)驗(yàn)室,,對(duì)試劑準(zhǔn)備一般不太注意,,通常的做法是,在實(shí)驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來即用,,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時(shí)間不夠的問題,,其直接的后果是對(duì)一些弱陽性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。
因此,,在ELISA測(cè)定中試劑的準(zhǔn)備蕞為關(guān)鍵的是,,在實(shí)驗(yàn)開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,,在室溫下放置20min以上后,,再進(jìn)行測(cè)定,以使試劑盒在使用前與室溫平衡,。這樣做的目的,,主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中,能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所要求的高度,,以滿足測(cè)定要求,。其次,目前的商品ELISA試劑盒中的洗板液均需在實(shí)驗(yàn)室使用時(shí)對(duì)所提供的濃縮液稀釋配制,,因此稀釋時(shí)所用的蒸餾水或去離子水應(yīng)保證質(zhì)量,。
此外,當(dāng)試劑盒以O(shè)PD為底物時(shí),,則底物溶液應(yīng)在反應(yīng)顯色前臨時(shí)配制,。
重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測(cè)的質(zhì)量
一、方法學(xué)的影響
ELISA測(cè)定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法,、間接法,、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法,、競爭抑制法,,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的競爭等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,,質(zhì)量較難控制,。
二、試劑因素
不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致,,即使是通過批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)結(jié)果也存在差異,,因此必須選擇和訂購長批號(hào)的試劑,并保證保存條件,。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號(hào)改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評(píng)估試劑的復(fù)雜過程,,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性,;對(duì)于效期短、使用率低的試劑,,應(yīng)當(dāng)小量分裝,,每次使用則取分裝部分即可,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效,。