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產(chǎn)品簡介
人冠狀病毒（Coronaviruses）Elisa試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法（Sandwich ELISA）檢測樣品中靶蛋白的的濃度,，其原理見圖2,。靶蛋白特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標板上，當加入標準品或樣品時,，其中的靶蛋白會與捕獲抗體結(jié)合,。當加入生物素化的抗靶蛋白抗體后，生物素化抗靶蛋白抗體與靶蛋白結(jié)合,，形成夾心的免疫復(fù)合物
詳細介紹
人冠狀病毒(Coronaviruses)Elisa試劑盒是一種敏感性高,，特異性強，重復(fù)性好的實驗方法,。由于其試劑穩(wěn)定,、易保存，操作簡便,，結(jié)果判斷較客觀等因素,，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。
實驗原理：
上海雅吉生物試劑盒檢測方法有:雙抗體夾心法、間接法,、競爭法
標本要求
1.血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
2.血漿：
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA,、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。
3.尿液：
用無菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心,。胸腹水、腦脊液參照此實行,。
4.細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時,，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。
5.培養(yǎng)細胞:
檢測細胞內(nèi)的成份時,，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液,，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清,。保存過程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。
6.組織標本:
切割標本后,，稱取重量,。加入一定量的PBS，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4）,，或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,，其余冷凍備用,。
7.標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行,，提取后應(yīng)盡快進行實驗,。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存,，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
8.不能檢測含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
標準品的稀釋：人冠狀病毒(Coronaviruses)Elisa試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。
2000pg/ml 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
1000pg/ml 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
500pg/ml 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
250pg/ml 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
125pg/ml 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）,、標準孔,、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外,。
溫育：操作同3,。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。
操作程序總結(jié)：
計算
以標準物的濃度為橫坐標,，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線,，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度,；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,，將樣品的OD值代入方程式,，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù),，即為樣品的實際濃度,。
人冠狀病毒(Coronaviruses)Elisa試劑盒
注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果,。
3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差,。一次加樣時間很好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣,。
請每次測定的同時做標準曲線，很好做復(fù)孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存,。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
保存條件及有效期
1．試劑盒保存：；2-8℃,。
2．有效期：6個月
本說明書48T同樣適用
上海雅吉生物ELISA試劑盒特點體現(xiàn)：
一,、高效、靈敏,、特異---采用全進口材料和抗體
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性---的科技水平
三、吸附性能好,，空白值低,，孔底透明度高的固相載體---嚴格的生產(chǎn)流程和規(guī)范操作
ELISA試劑盒適用范圍：
一．適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型,；
二．可檢測動物類型豐富：人,、猴、大鼠,、小鼠,、豚鼠、兔,、豬,、犬、牛,、綿羊,、雞、蝦,、魚等
三．可檢測指標齊全：白介素,，干擾素，血管緊張素,，肺炎衣原體,，趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶,、炎癥因子,、血管生成素 等等 指標
人冠狀病毒(Coronaviruses)Elisa試劑盒免費代測服務(wù)：
1.每個指標需提供100微升樣品，如做復(fù)孔則200微升
2,、標本離心處理后請使用泡沫箱加冰袋郵寄至我司,；
2、樣本在一周內(nèi)使用,，保存條件2-8度,；
3,、代測服務(wù)只反饋實驗結(jié)果原數(shù)據(jù)信息，不再提供相應(yīng)試劑盒,；
4,、需支付相應(yīng)試劑盒費用，代測不產(chǎn)生任何費用,；
上海雅吉生物科技有限公司坐落于上海松江科技技園區(qū),，現(xiàn)擁有來自人、小鼠,、大鼠,、兔、豬等種屬的試劑盒5000余種,，還可根據(jù)客戶要求定做試劑盒,，提供免費代測服務(wù)。質(zhì)量好,，使我們擁有*的客戶,；價格低，薄利多銷是我們生存的優(yōu)勢?,；服務(wù)好,，讓我們在業(yè)界擁有很好的口碑。我們將一如既往堅持質(zhì)量*,，誠信為本的理念,。?感謝新老客戶的博愛！,！
上海雅吉生物科技有限公司鄭重承諾
凡購買本公司試劑盒有非人為質(zhì)量問題,，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換