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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞采用先用胰蛋白酶短時(shí)間消化,、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來(lái),，細(xì)胞總量T25瓶；細(xì)胞經(jīng)堿性磷酸酶染色和茜素紅染色鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
詳細(xì)介紹
Cat NO.: CP-R194
1.產(chǎn)品名稱：大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞
2.組織來(lái)源：牙周膜組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
4.細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大鼠牙周膜成纖維細(xì)胞分離自牙周膜組織；牙周膜（牙周韌帶,、牙周間隙）是由致密結(jié)締組織所構(gòu)成,。多數(shù)纖維排列成束，纖維的一端埋于牙骨質(zhì)內(nèi),，另一端則埋于牙槽窩骨壁里,，使牙齒固位于牙槽窩內(nèi)；牙周膜內(nèi)有神,、血管,、淋巴和上皮細(xì)胞等。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚,，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),，在一定條件下,，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的牙周膜成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁*,，伸展成梭形，胞核清晰,，分布較均勻,，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán),；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長(zhǎng),，平坦,、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。牙周膜成纖維細(xì)胞（PLFs）作為牙周膜的主體細(xì)胞,，是牙周膜主要的間質(zhì)細(xì)胞,，它不僅具有合成膠原、基質(zhì),、彈力纖維和糖蛋白的功能,，還有吸收膠原吞噬異物的能力，還參與了牙周組織的病變,、修復(fù)及再生過(guò)程?，F(xiàn)在，利用牙周膜細(xì)胞建立體外模型,，已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段,。
本公司生產(chǎn)的采用膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息：
DMEM[H]、FBS,、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號(hào)：CM-R194）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。
T25瓶細(xì)胞處理方法
收到細(xì)胞后,，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,。如有破損漏液等問(wèn)題,，請(qǐng)即時(shí)。并進(jìn)行以下操作：
1.75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部,。
2.將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理,，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3.預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清,，1%雙抗）,。
4.顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）,。
5.①若細(xì)胞密度較小,，無(wú)菌操作，去掉培養(yǎng)基,。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基,。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上,，進(jìn)行傳代,。
②若細(xì)胞密度較大，達(dá)到80%以上,，將細(xì)胞傳代培養(yǎng),。
注：
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%，建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基,。由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，這時(shí)請(qǐng)?jiān)谂恼蘸髮腋〉募?xì)胞即時(shí)離心,，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天,；同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基。（這里是針對(duì)原來(lái)*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,，如果原來(lái)FBS濃度是20%,，可以增加到25%FBS濃度） 收到細(xì)胞后如細(xì)胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題，煩請(qǐng)當(dāng)天盡快并提供圖片,，以便售后處理,。7天內(nèi)反饋，細(xì)胞本身問(wèn)題免費(fèi)重發(fā)如人為原因?qū)е驴筛鶕?jù)實(shí)際情況酌情處理,；7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格,，不予免費(fèi)售后