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產(chǎn)品簡介
大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞采用先用胰蛋白酶短時間消化,、后用膠原酶反復消化制備而來,，細胞總量T25瓶,；細胞經(jīng)堿性磷酸酶染色和茜素紅染色鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
詳細介紹
1.產(chǎn)品名稱：大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞
2.組織來源：肺組織
3.產(chǎn)品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞分離自肺組織,；肺泡由單層上皮細胞構成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復分枝成無數(shù)細支氣管,，它們的末端膨大成囊,，囊的四周有很多突出的小囊泡，即為肺泡,。小肺泡細胞,，又稱I型肺泡細胞，厚約0.1微米,，基底部是基底膜,，無增殖能力。大肺泡細胞,，又稱Ⅱ型肺泡細胞,，分泌表面活性物質（二棕櫚酰卵磷脂），以降低肺泡表面張力,。Ⅱ型肺泡細胞位于Ⅰ型肺泡細胞之間,，數(shù)量較Ⅰ型肺泡細胞多，但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細胞小,。細胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔,。細胞核圓形，胞質著色淺,、呈泡沫狀。電鏡下,，細胞游離而有少量微絨毛,，胞質內(nèi)富含線粒體和溶酶體，有較發(fā)達的粗面內(nèi)質網(wǎng)和高爾基復合體,。核上方有較多的分泌顆粒,，電子密度高、大小不等,，直徑約0.1-1.0μm顆粒內(nèi)含有平行排列的板層狀結構,，稱為嗜餓性板層小體,。小體內(nèi)的主要成分為磷脂，以二棕櫚酰卵磷脂為主,，此外還有糖胺多糖及蛋白質等,。顆粒內(nèi)物質釋放出來后，在肺泡表面形成一層粘液層,，稱為表面活性物質（surfactant）,。表面活性物質有降低肺泡表面張力、穩(wěn)定肺泡大小的作用,。呼氣時肺泡縮小,，表面活性物質密度增加，表面張力降低,，防止肺泡過度塌陷,；吸氣時肺泡擴張，表面活性物質密度減小,，肺泡回縮力加大,，可防止肺泡過度膨脹。表面活性物質的缺乏或變性均可引起肺不張,，過度通氣可造成表面活性物質缺乏,；吸入毒氣可直接破壞表面活性物質。Ⅱ型肺泡細胞有分裂,、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細胞的潛能,，故具有修復受損傷上皮的作用。
本公司生產(chǎn)的采用胰蛋白酶-膠原酶混合灌注消化法結合差速貼壁法,，并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞經(jīng)SP-C免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
5.培養(yǎng)基信息：
M199、FBS,、上皮細胞生長添加劑,、Hydrocortisone、Insulin,、Transferrin,、Epinephrine,、Penicillin、Streptomycin等
我們推薦使用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：CM-R003）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基,。
T25瓶細胞處理方法
收到細胞后,，檢查外包裝是否完整，細胞培養(yǎng)瓶是否完好,。如有破損漏液等問題,，請即時。并進行以下操作：
1.75%酒精棉球擦拭T25細胞培養(yǎng)瓶外部,。
2.將細胞放入37度培養(yǎng)箱中預溫3-4小時后再做處理,，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3.預熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清,，1%雙抗）,。
4.顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）,。
5.①若細胞密度較小,，無菌操作，去掉培養(yǎng)基,。每瓶添加第四步中準備的5-6ml培養(yǎng)基,。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度達到80%以上,，進行傳代,。
②若細胞密度較大，達到80%以上,，將細胞傳代培養(yǎng),。
注：
培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基血清濃度為5%，建議更換成自己配好的新鮮培養(yǎng)基,。由于運輸過程中的問題,，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,，這時請在拍照后將懸浮的細胞即時離心,，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,。（這里是針對原來*培養(yǎng)基FBS濃度是10%的情況,，如果原來FBS濃度是20%，可以增加到25%FBS濃度） 收到細胞后如細胞狀態(tài)不佳或培養(yǎng)中遇到問題,，煩請當天盡快并提供圖片，以便售后處理,。7天內(nèi)反饋,，細胞本身問題免費重發(fā)如人為原因導致可根據(jù)實際情況酌情處理,；7天內(nèi)未接到任何反饋視為合格，不予免費售后