詳細介紹
CFDA SE(細胞增殖示蹤熒光探針)CFDA SE的全稱為Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester,,是一種近年來被廣泛應用的細胞增殖檢測用熒光探針,,也可以用于細胞的熒光示蹤。
基于CFDA SE熒光標記的細胞增殖檢測和[3H]-thymidine摻入,、BrdU標記獲得的檢測結果**,,但同時可以提供更多的細胞增殖信息。使用CFDA SE檢測可以提供整個細胞群中有多少比例的細胞分裂了1次,、2次或更多次數(shù),,同時如果和其它熒光探針聯(lián)用,,可以獲取不同分裂次數(shù)細胞的其它相關信息。
CFDA-SE的分子式為C29H19,,分子量為557.47,,CAS number為150347-59-4。CFDA SE可以通透細胞膜,,進入細胞后可以被細胞內的酯酶(esterase)催化分解成CFSE,,CFSE可以偶發(fā)性地(spontaneously)并不可逆地和細胞內蛋白的Lysine殘基或其它氨基發(fā)生結合反應,并標記這些蛋白,。在加入熒光探針CFDA SE后大約24小時,,即可充分標記細胞。被CFDA SE標記的非分裂細胞的熒光非常穩(wěn)定,,穩(wěn)定標記的時間可達數(shù)個月,。CFDA SE標記細胞的熒光非常均一,比以前使用的其它細胞示蹤熒光探針例如PKH26的熒光更加均一,,并且 分裂后的子代細胞的熒光分配也更均勻,。
CFDA SE(細胞增殖示蹤熒光探針)由于CFDA SE標記細胞的熒光非常均勻和穩(wěn)定,每分裂一次子代細胞的熒光會減弱一半,,這樣通過流式細胞儀檢測就可以檢測出沒有分裂的細胞,,分裂一次的細胞(1/2的熒光強度),分離兩次的細胞(1/4的熒光強度),,分裂三次的細胞(1/8的熒光強度)以及類似的其它分裂次數(shù)的細胞,。采用CFDA SE通過流式細胞儀檢測獲得的檢測結果參考右圖。每一個峰代表一種分裂次數(shù)的細胞,,從右至左的峰通常依次為分裂0次,、1次、2次,、3次等次數(shù)的細胞,。分裂次數(shù)較多后,分裂0次或1次等沒有分裂或分裂次數(shù)較少的細胞會逐漸減少直至檢測不到,。
使用CFDA SE可以檢測分裂多達8次或更多次數(shù)的細胞增殖,。
目前CFDA SE標記細胞后通常用流式細胞儀進行細胞增殖檢測。zui常用于淋巴細胞的增殖檢測,,也可以用于成纖維細胞,、NK細胞等其它細胞的增殖檢測,甚至還可以用于細菌增殖的檢測,。
CFDA SE標記細胞呈綠色熒光,,檢測時的激發(fā)波長可以選擇488nm,此時的發(fā)射波長為518nm,使用流式細胞儀檢測時可以采用FL1 detection channel,。CFDA SE標記的細胞也可以用熒光顯微鏡進行觀察,。
CFDA SE標記的細胞無論在體外還是體內都不會使鄰近細胞染色。即CFDA SE熒光探針完成標記后不會從一個細胞轉移到鄰近細胞,。
CFDA SE標記細胞僅需5-15分鐘即可完成,。對于不同細胞,*標記時間需自行摸索,。
CFDA SE可以使用無水DMSO(anhydrous DMSO)配制,配制濃度通常為2-10mM,,該溶液宜盡快使用,,zui長保存時間不宜超過2個月。CFDA SE易被水解,,如用PBS或其他溶液配制好的工作液須盡快使用,,否則在水溶液中會很快變質。在標記細胞的過程中和水接觸是在許可的范圍內的,。CFDA SE標記細胞時的zui終濃度通常為0.2-10μM或更高一些,。
在工作濃度為5μM時,一個包裝的本產(chǎn)品共可以標記約1.8升的細胞,。
包裝清單:
產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 包裝
C1031 CFDA SE(細胞增殖示蹤熒光探針) 5mg
— 說明書 1份
保存條件:
-20℃避光保存,,半年有效。
CFDA SE(細胞增殖示蹤熒光探針)注意事項:
熒光染料均存在淬滅問題,,請盡量注意避光,,以減緩熒光淬滅。
本產(chǎn)品*于專業(yè)人員的科學研究用,,不得用于臨床診斷或治療,,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內,。
為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作。