詳細(xì)介紹
在研究細(xì)胞時(shí)經(jīng)常要研究細(xì)胞的不同組份,而研究得zui多的兩個(gè)細(xì)胞組份就是細(xì)胞核和細(xì)胞漿。分離細(xì)胞核蛋白和細(xì)胞漿蛋白,,不僅可以用于研究蛋白在細(xì)胞內(nèi)的定位,,而且很多時(shí)候分離出來的核蛋白可以用于轉(zhuǎn)錄調(diào)控方面的研究,例如EMSA(也稱gel shift),,footprinting等,。
細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒(Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit)提供了一種比較簡(jiǎn)單、方便的從培養(yǎng)細(xì)胞或新鮮組織中抽提細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白的方法,。約90分鐘就可以完成培養(yǎng)細(xì)胞的細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白的分離,。抽提得到的蛋白可以用于Western,EMSA,,footprinting,,報(bào)告基因檢測(cè)以及酶活力測(cè)定等后續(xù)操作。
本試劑盒是通過細(xì)胞漿蛋白抽提試劑A和B,,在低滲透壓條件下,,使細(xì)胞充分膨脹,然后破壞細(xì)胞膜,,釋放出細(xì)胞漿蛋白,,然后通過離心得到細(xì)胞核沉淀。zui后通過高鹽的細(xì)胞核蛋白抽提試劑抽提得到細(xì)胞核蛋白,。
對(duì)于細(xì)胞樣品,,如果每個(gè)樣品的數(shù)量不超過二百萬個(gè)細(xì)胞,本試劑盒可以抽提50個(gè)樣品,;對(duì)于組織樣品,,如果每個(gè)樣品的重量不超過30毫克,本試劑盒可以抽提50個(gè)樣品,,如果每個(gè)樣品約為30-60毫克,,本試劑盒可以抽提37個(gè)樣品。
包裝清單:
產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝
P0027-1 細(xì)胞漿蛋白抽提試劑A 15ml
P0027-2 細(xì)胞漿蛋白抽提試劑B 0.5ml
P0027-3 細(xì)胞核蛋白抽提試劑 2.5ml
— 說明書 1份
保存條件:
-20℃保存,,一年有效。
細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒注意事項(xiàng):
需自備PMSF,。PMSF一定要在抽提試劑加入到樣品中前2-3分鐘內(nèi)加入,,以免PMSF在水溶液中很快失效。PMSF(ST506)可以向碧云天訂購(gòu),。
抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進(jìn)行,。
本試劑盒對(duì)于組織樣品,僅適合于新鮮組織,,對(duì)凍存過的組織抽提效果很差,。
使用本抽提到的細(xì)胞核蛋白與細(xì)胞漿蛋白均可直接用碧云天生產(chǎn)的BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P0009/P0010/P0010S/P0011/P0012/P0012S)測(cè)定蛋白濃度。但不適合用Bradford法測(cè)定蛋白濃度,。
本產(chǎn)品*于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,,不得用于臨床診斷或治療,,不得用于食品或藥品,不得存放于普通住宅內(nèi),。
為了您的安全和健康,,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。