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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
GST標(biāo)簽蛋白純化試劑盒（GST-tag Protein Purification Kit）,，俗稱GST柱試劑盒,，是一種采用了新型的BeyoGold™ GST-tag Purification Resin，并能簡(jiǎn)單,、快速,、高效并且高特異性地純化GST標(biāo)簽蛋白的試劑盒。
詳細(xì)介紹
上海雅吉生物的GST標(biāo)簽蛋白純化試劑盒(GST-tag Protein Purification Kit),，俗稱GST柱試劑盒,，是一種采用了新型的BeyoGold™ GST-tag Purification Resin，并能簡(jiǎn)單,、快速,、高效并且高特異性地純化GST標(biāo)簽蛋白的試劑盒。
試劑盒提供了GST標(biāo)簽蛋白純化所需的相關(guān)試劑和親和層析柱空柱管,，為GST標(biāo)簽蛋白的純化帶來(lái)了極大的便利,。
GST，即谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶,，與目的蛋白融合表達(dá)后,，被稱為GST標(biāo)簽重組蛋白、GST標(biāo)簽蛋白或GST融合蛋白,。GST標(biāo)簽重組蛋白可以通過(guò)GST特異性地結(jié)合到BeyoGold™ GST-tag Purification Resin,，而其它蛋白則不能被結(jié)合，含GST標(biāo)簽的重組蛋白可被過(guò)量的還原型谷胱甘肽(GSH)溶液洗脫，從而實(shí)現(xiàn)GST標(biāo)簽蛋白的分離和純化,。由于純化過(guò)程始終保持在溫和的非變性條件下,，得到的目的蛋白可以保持其自身的生物學(xué)活性，因此可以用于常規(guī)的結(jié)構(gòu)和功能研究,、抗體制備,、以及蛋白與蛋白相互作用、蛋白與核酸相互作用等方面的研究,。
GST標(biāo)簽蛋白純化試劑盒不僅可以用于大腸桿菌表達(dá)的GST標(biāo)簽重組蛋白的純化,，也可以用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞及桿狀病毒等其它表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)的GST標(biāo)簽重組蛋白,。
GST標(biāo)簽重組蛋白在大腸桿菌中表達(dá)時(shí)具有可溶性高,，并且容易保持目的蛋白完整活性等優(yōu)點(diǎn)。許多真核蛋白在大腸桿菌中是以包涵體的形式表達(dá)的,，但當(dāng)它們?cè)诖竽c桿菌中與GST融合表達(dá)時(shí)，相當(dāng)一部分可以實(shí)現(xiàn)可溶性表達(dá),，從而有利于后續(xù)的純化,。
如果在GST標(biāo)簽和目的蛋白之間含有位點(diǎn)特異性的蛋白酶識(shí)別位點(diǎn)，如PreScission Protease, TEV Protease或Thrombin等,，則可用相應(yīng)的蛋白酶切除GST標(biāo)簽,。
通常在目的蛋白的N端加上GST標(biāo)簽可以保留GST的酶活性，從而便于使用BeyoGold™ GST-tag Purification Resin進(jìn)行GST標(biāo)簽重組蛋白的純化,。
本試劑盒中的BeyoGold™ GST-tag Purification Resin采用了一種高度交聯(lián)的6%瓊脂糖凝膠(Sepharose CL-6B)為基質(zhì),，并使用了進(jìn)一步優(yōu)化的接臂和GSH偶聯(lián)技術(shù)，可以高容量,、高特異性地結(jié)合GST標(biāo)簽重組蛋白,。和目前市售的大多數(shù)同類產(chǎn)品相比，非特異性蛋白結(jié)合更低,，耐受壓力更強(qiáng),，GSH的偶聯(lián)更加穩(wěn)定。
BeyoGold™ GST-tag Purification Resin凝膠的顆粒直徑為45-165μm,?？赡褪艿膠ui大壓力為0.025MPa，約合5.8psi,。采用固定流速進(jìn)行蛋白純化時(shí)的推薦流速為0.5ml/min,。
BeyoGold™ GST-tag Purification Resin儲(chǔ)存在20%乙醇中，10ml總體積中5ml為凝膠,，5ml為液體,。使用時(shí)宜把凝膠充分重懸后再吸取。
BeyoGold™ GST-tag Purification Resin對(duì)含GST標(biāo)簽重組蛋白的結(jié)合容量大，其對(duì)GSTzui大結(jié)合量為5-6mg蛋白/毫升凝膠,，與的同類產(chǎn)品結(jié)合容量相當(dāng),。實(shí)際使用時(shí)的zui大結(jié)合量取決于待純化的GST標(biāo)簽重組蛋白的分子量大小，分子量越大則zui大結(jié)合容量越大,，分子量越小則zui大結(jié)合容量越小,。對(duì)于目的蛋白分子量為50kD的GST標(biāo)簽重組蛋白，每毫升凝膠的實(shí)際zui大純化量約為8-12mg,，對(duì)于目的蛋白分子量為100kD的GST標(biāo)簽重組蛋白,，每毫升凝膠的實(shí)際zui大純化量約為12-18mg。但對(duì)于分子量相同的蛋白,，也會(huì)因?yàn)榈鞍妆旧硖匦缘牟煌?，結(jié)合的zui大容量也會(huì)有所不同。
一個(gè)包裝的本產(chǎn)品zui多可純化10種帶有GST標(biāo)簽的重組蛋白,，每種蛋白的zui大純化量約為12mg,。對(duì)于目的蛋白分子量為50kD的GST標(biāo)簽重組蛋白，一個(gè)包裝的本產(chǎn)品實(shí)際zui多可純化10種約4-6mg蛋白,。在不使用親和層析柱空柱管的情況下,，參考本說(shuō)明書，本試劑盒足夠進(jìn)行500次的小量GST標(biāo)簽蛋白純化,。
包裝清單：
產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝
P2262-1 BeyoGold™ GST-tag Purification Resin 10ml
P2262-2 裂解緩沖液 180ml
P2262-3 洗脫緩沖液(需添加GSH) 60ml
P2262-4 GSH 184mg
P2262-5 溶菌酶 60mg
P2262-6 親和層析柱空柱管(3毫升) 10套
— 說(shuō)明書 1份
保存條件：
4℃保存,，至少一年有效。除BeyoGold™ GST-tag Purification Resin外,，其余均可以-20℃保存,。
注意事項(xiàng)：
請(qǐng)勿在-20℃或更低溫度冷凍保存BeyoGold™ GST-tag Purification Resin。
BeyoGold™ GST-tag Purification Resin保存和純化過(guò)程中應(yīng)始終保持凝膠濕潤(rùn),。
有多種不同容量的親和層析柱空柱管(FCL01/FCL03/FCL06/FCL12/FCL30/FCL60),，可以和本產(chǎn)品配合使用。
若離心不能*除去蛋白樣品中的不溶物,，可以將樣品溶液用0.45μm的濾膜過(guò)濾,。
GST標(biāo)簽蛋白的純化應(yīng)始終保持在非變性條件下，如果融合蛋白以包涵體形式表達(dá),，在使用8M尿素或6M鹽酸胍溶解包涵體后,，需要通過(guò)透析去除尿素和鹽酸胍并使蛋白復(fù)性后才能使用本產(chǎn)品進(jìn)行純化。
蛋白樣品收集后宜盡快完成純化工作,，并應(yīng)始終放置在4℃或冰浴,，以減緩蛋白降解。為有效抑制蛋白降解,，可以在裂解液中添加適量的蛋白酶抑制劑混合物,，例如P1025/P1026蛋白酶抑制劑混合物(細(xì)菌抽提用),，或P1005/P1006蛋白酶抑制劑混合物(通用型)。
*于專業(yè)人員的科學(xué)研究用,，不得用于臨床診斷或治療,，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi),。
為了您的安全和健康,，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。