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產(chǎn)品簡介
酵母質(zhì)粒小量抽提試劑盒（Yeast Plasmid Mini Preparation Kit）是一種使用破壁酶（Lyticase）消化去除酵母細胞壁，然后采用一種新型的酵母質(zhì)粒純化柱實現(xiàn)從酵母細胞中進行小量質(zhì)粒快速抽提的試劑盒。無需酚氯抽提,，無需酒精沉淀，12個樣品只需約1-1.5小時即可完成,。
詳細介紹
上海雅吉的酵母質(zhì)粒小量提取試劑盒(Yeast Plasmid Mini Preparation Kit)是一種使用破壁酶(Lyticase)消化去除酵母細胞壁,，然后采用一種新型的酵母質(zhì)粒純化柱實現(xiàn)從酵母細胞中進行小量質(zhì)粒快速抽提的試劑盒,。
無需酚氯抽提,，無需酒精沉淀，12個樣品只需約1-1.5小時即可完成,。
試劑盒提供了破壁酶(Lyticase),，酵母收集后，加入Lyticase消化去除細胞壁,，接著采用傳統(tǒng)堿裂法裂解細胞,，然后將獲得的上清液轉移至結合柱結合DNA，經(jīng)過離心快速洗滌,，zui后用洗脫液洗脫出酵母質(zhì)粒DNA,。
由于采用了高濃度的破壁酶,，無需再使用玻璃珠，可以避免因為玻璃珠的機械作用帶來的酵母基因組DNA污染,。
每個質(zhì)粒純化柱可以結合的質(zhì)粒量的上限約為20微克,。質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量依賴于酵母攜帶質(zhì)粒的拷貝數(shù)，酵母菌株以及生長條件,。通常酵母質(zhì)粒的拷貝數(shù)較低,，1.5-5ml培養(yǎng)過夜的酵母抽提獲得的質(zhì)粒DNA量約為1-3微克左右。高拷貝酵母質(zhì)粒抽提時的得率會大大提高,。抽提所得質(zhì)粒的量與酵母培養(yǎng)濃度,、質(zhì)粒拷貝數(shù),、酵母品系等因素有關,。
使用酵母質(zhì)粒小量抽提試劑盒抽提得到的酵母質(zhì)粒DNA可用于各種常規(guī)分子生物學實驗，如轉化,、PCR、基于PCR的突變,、體外轉錄,、酶切、測序,、文庫篩選等,。
產(chǎn)品清單
保存條件：
D0029-8需-20℃保存，其余室溫保存,，一年有效,。D0029-8為粉末，短時間4℃存放不影響其活性,。D0029-8配制成Lyticase溶液后4℃可以保存1個月,，-20℃可以保存6個月。
注意事項：
*次使用前把試劑盒提供的RNase A全部加到溶液Ⅰ(懸浮液)中,，混勻,，并在瓶上做好標記。加入RNase A后4℃存放,。
*次使用前在每瓶溶液Ⅳ(洗滌液)中加入27ml無水乙醇,，混勻，并在瓶上做好標記,。
*次使用前吸取1ml Lyticase配制液到Lyticase粉末中,，*溶解后即為Lyticase溶液。配制好的Lyticase溶液4℃可以保存1個月,，-20℃可以保存6個月,。如需-20℃保存,，zui能適當分裝。Lyticase溶液配制后或凍存后再溶解可能會出現(xiàn)輕微混濁,，屬正?，F(xiàn)象，請混勻后使用,。
溫度較低時,，溶液Ⅱ和溶液Ⅲ可能會有沉淀產(chǎn)生。使用前必須檢查一遍,。如有沉淀,，37℃水浴加熱溶解，混勻后使用,。溶液Ⅱ請勿過分劇烈混勻,，否則會產(chǎn)生大量氣泡。
溶液Ⅱ使用完后,，一定要蓋緊瓶蓋,，防止被空氣中二氧化碳酸化。
溶液II有強堿性,，溶液Ⅱ,、溶液Ⅲ和Lyticase對人體有刺激性，操作時請小心,，并注意適當防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi),。
酵母質(zhì)粒小量抽提試劑盒所有操作均在室溫進行，操作時無需冰浴,。所有離心也均在室溫進行,。
廢液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丟棄,。
*于專業(yè)人員的科學研究用,，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品,，不得存放于普通住宅內(nèi),。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作,。