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如何鑒定子癇前期大鼠胎盤(pán)模型中的自然殺傷細(xì)胞
閱讀：193 發(fā)布時(shí)間：2018-10-17| 提 供 商 | 上海雅吉生物科技有限公司 | 資料大小 | 216.4KB |
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1,、介紹
多年來(lái),，大鼠已經(jīng)成為了學(xué)術(shù)界和產(chǎn)業(yè)界廣泛采用的重要臨床前動(dòng)物模型系統(tǒng)。使用大鼠進(jìn)行研究的一個(gè)重要方面就是生殖,。子癇前期是一種會(huì)對(duì)大多數(shù)懷孕造成影響的疾病,，它是一種因孕婦出現(xiàn)高血壓而引起的并發(fā)癥。子癇前期通常與慢性炎癥相關(guān),，而且還會(huì)危及孕婦和胎兒的生命,。選用妊娠大鼠模型來(lái)研究胎盤(pán)的免疫反應(yīng)，有助于我們了解子癇前期,，而我們研究的終目的是研發(fā)出一種治療方法,，以完善這種嚴(yán)重疾病的發(fā)病機(jī)制。在本文中,，我們對(duì)大鼠胎盤(pán)中存在的自然殺傷細(xì)胞進(jìn)行了表征,。
2、材料與方法
采用無(wú)痛致死術(shù)將大鼠于妊娠 19 天處死,，并摘取胎盤(pán),。從胎盤(pán)中獲取單細(xì)胞懸液。4℃ 孵育細(xì)胞 30 分鐘,，添加或不添加抗體,，以自然殺傷細(xì)胞標(biāo)記物 ANK61 抗體進(jìn)行標(biāo)記。隨后,，400 g 離心 5 分鐘,，將上述兩種情況下得到的細(xì)胞洗滌 3 次，并將其放在 4℃ 避光條件下,，用二抗 5-FITC 孵育 30 分鐘,。后，將這些細(xì)胞洗滌 3 次,，并重懸于含有 50% 福爾馬林的 RPMI 中,。使用 CytoFLEX* 流式細(xì)胞儀對(duì)這些細(xì)胞進(jìn)行分析。分析結(jié)果顯示,，陽(yáng)性染色細(xì)胞的百分比大于陰性對(duì)照組,。
3、試劑
ANK61 小鼠抗大鼠單克隆純化抗體 / Abcamab36392,。
山羊抗小鼠 FITC / Abcam ab6785,。
4,、數(shù)據(jù)分析
FSC-A x SSC-A 活性設(shè)門(mén)
圖 1. 山羊抗小鼠二抗 FITC（藍(lán)色）與 ANK61 小鼠抗大鼠一抗山羊抗小鼠 二抗 FITC（綠色）的疊加直方圖。
5,、結(jié)果
本文利用 CytoFLEX 流式細(xì)胞儀展示大鼠胎盤(pán)中被激活 NK 細(xì)胞出現(xiàn)增長(zhǎng)的現(xiàn)象,，促使我們能夠進(jìn)一步對(duì)胎盤(pán)中的免疫反應(yīng)進(jìn)行表征，從而進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)了了解子癇前期病理生理學(xué)機(jī)制的終目的,。
6,、參考文獻(xiàn)
Amaral LM, Cunningham Jr MW, Cornelius DC, LaMarca B. Preeclampsia: long term consequences for vascular health.Vasc Health Risk Manag.2015 in press.
*本產(chǎn)品僅用于科研，不用于臨床診斷,。
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