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一、產(chǎn)品簡介

大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞說明書

1、產(chǎn)品名稱：大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞

2,、組織來源：大鼠骨骼肌

3、產(chǎn)品規(guī)格：5×105 細(xì)胞/25cm2 培養(yǎng)瓶

4,、細(xì)胞簡介： 骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維（肌細(xì)胞）外的一種扁平,、有突起的細(xì)胞。其

附著于肌纖維

（肌細(xì)胞）表面,；當(dāng)肌纖維（肌細(xì)胞）受損后,，肌衛(wèi)星細(xì)胞可增殖分化，參與肌纖維（肌細(xì)胞）的修復(fù),，

因此具有干細(xì)胞性質(zhì),。

本公司生產(chǎn)的大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞采用酶解法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105/T25 方瓶,，細(xì)胞純度可

達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

培養(yǎng)基信息：

我們推薦使用大鼠骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞*培養(yǎng)液（產(chǎn)品編號：KR5083-5）作為體外培養(yǎng)大鼠骨骼肌衛(wèi)星

細(xì)胞的培養(yǎng)基,。

二,、使用方法

1、您收到細(xì)胞后,，請按照以下方法進行操作：

取出T-25cm2培養(yǎng)瓶,，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜,，放入37℃,，5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置4-6

小時或過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),，然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代,。

2、細(xì)胞傳代：

1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,，棄25cm2 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,，用PBS 清洗細(xì)胞一次；

2）添加0.125%胰蛋白酶消化液約2ml 至培養(yǎng)瓶中,，倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后加入*

培養(yǎng)液終止消化,，再輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml 離心管中,，1500rpm/min,，離心

5min；

3）棄上清,，沉淀細(xì)胞用12ml *培養(yǎng)基重懸,，然后按1:2 比例進行分瓶傳代，后放入37℃,，

5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

4）待細(xì)胞*貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果,，之后進行換液培養(yǎng)或傳代,。

3、細(xì)胞凍存：

1）細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,，棄25cm2 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,，用PBS 清洗細(xì)胞一次；

2）添加0.125%胰蛋白酶消化液約2ml 至培養(yǎng)瓶中,，倒置顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打

細(xì)胞使之脫落，再加入*培養(yǎng)液終止消化,，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml 離心管中,，1500rpm/min，離心

5min,；

3）用適當(dāng)量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細(xì)胞,，并放置于凍存管中；

4）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,，然后將其移入-80℃過夜,，24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。

4,、細(xì)胞復(fù)蘇：

1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）,， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存

管中無結(jié)晶,，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁,；

2）將凍存管中的細(xì)胞移至15ml 無菌離心管中，滴加入*培養(yǎng)液5ml 混勻細(xì)胞,，然后將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)

移至適當(dāng)面積大小的培養(yǎng)皿中,；

3）放置于37℃，5%CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

4）第二天,，換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。

三、注意事項

1,、培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6 個月,；

2、在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,，請注意保持無菌操作,；

3、該細(xì)胞只可用于科研,；