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人脈絡膜血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)方法
閱讀：210 發(fā)布時間：2018-7-2人脈絡膜血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)方法
一,、產(chǎn)品簡介
1. 產(chǎn)品名稱：人脈絡膜血管內(nèi)皮細胞
2. 組織來源：脈絡膜組織
3. 產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25 細胞培養(yǎng)瓶
4. 細胞簡介：
人脈絡膜血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)方法人脈絡膜血管內(nèi)皮細胞分離自眼球脈絡膜組織；脈絡膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之
間,，含有豐富血管和色素細胞,，對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差，當眼球受到從
前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時,，堅硬的鞏膜在其外面又有抵
抗作用,，使脈絡膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色,，
圍繞視神經(jīng)乳頭部有照膜,，為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡膜是眼球中膜
的后2/3 處的薄膜,，由纖維組織,、小血管和毛細血管組成,，軟而薄，棕紅色,，在
鞏膜和視網(wǎng)膜之間,，續(xù)連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層,，其含
有的豐富色素起遮光暗房作用,。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體，并有遮光
作用,，使反射的物象清楚,。同時對視覺系統(tǒng)起保護作用，對整個視覺神經(jīng)有調(diào)節(jié)
作用,。續(xù)連于睫狀體后方,，含豐富的血管和色素細胞，有營養(yǎng)和遮光作用,。
本公司生產(chǎn)的脈絡膜血管內(nèi)皮細胞采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法并通過
內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×105cells/瓶；細胞經(jīng)
CD31/vWF 免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支
原體、細菌,、酵母和真菌等,。
5. 培養(yǎng)基信息：
M199、FBS,、內(nèi)皮細胞生長添加劑,、Heparin、Ascorbic Acid,、Hydrocortisone,、
Penicillin、Streptomycin 等
二,、細胞培養(yǎng)狀態(tài)發(fā)貨時發(fā)送
細胞電子版照片
人脈絡膜血管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)方法三,、使用方法
在技術部標準操作流程下，人脈絡膜血管內(nèi)皮細胞可傳3-5 代,；建議您收到細胞
后盡快進行相關實驗,。
客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25 細胞培養(yǎng)瓶,，用75%酒精消毒瓶身,，拆下封口膜，放入37℃,、5%CO2,、飽
和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài),。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出T25 細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,，用PBS 清洗細胞一次,；
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL 至培養(yǎng)瓶中，輕微轉動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個
培養(yǎng)瓶底后,，吸出多余胰蛋白酶消化液,，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀
察,，待細胞回縮變圓后,，再加入5ml *培養(yǎng)基終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻,，按1:2-1:3 適當?shù)谋壤M行接種傳代,，然后補充新鮮的完
全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃,、5%CO2,、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；
4) 待細胞*貼壁后,，培養(yǎng)觀察,；之后每隔2-3 天更換新鮮的*培養(yǎng)基。
四,、注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6 個月,。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作,。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài),。
4. 建議客戶收到細胞后前3 天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,，記錄細胞狀態(tài)，便于和
技術部溝通,；由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我
們,，詳盡告知細胞的具體情況,，以便我們的技術人員跟蹤,、回訪直至問題得
到解決。
5. 該細胞只可用于科研,。
備注：由于實驗所用試劑,、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考