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人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞WERI-RB-1
閱讀：159 發(fā)布時(shí)間：2018-6-5| 提 供 商 | 上海雅吉生物科技有限公司 | 資料大小 | 1.2MB |
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| 資料圖片 | 下載次數(shù) | 91次 | |
| 資料類型 | PNG 圖片 | 瀏覽次數(shù) | 159次 |
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一．產(chǎn)品簡(jiǎn)介
1、細(xì)胞名稱：WERI-RB-1;人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞
2,、生長(zhǎng)特性： □ 貼壁 □ 懸浮 □半懸浮半貼壁
3,、細(xì)胞生長(zhǎng)條件：
培養(yǎng)條件 | 90%1640+10%FBS+1%雙抗 |
溫度 | 37℃ |
空氣條件 | 5% CO2，,95% AIR |
傳代方法 | 1:2傳代,，2~3天換液 |
凍存條件 | 90%FBS+10%DMSO |
二．使用方法
1,、您收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作：
取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶,，拆下封口膜，放入37℃,，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置2-3小時(shí)以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),，然后離心換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進(jìn)行傳代。
2,、細(xì)胞傳代：
待細(xì)胞達(dá)到一定密度（不超過1x10^6/ml）可按照以下方法換液培養(yǎng)或傳代,。
方法①：收集細(xì)胞，1000rpm離心5min,，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法②：可選擇半數(shù)換液方式,，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
3、細(xì)胞凍存：
1）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,，1000rpm離心5min,；
2）用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中,；
3）先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,，然后將其移入-80℃過夜，24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存,。使用程序降溫盒可直接放入-80℃,。
4、細(xì)胞復(fù)蘇：
1）從液氮中取出細(xì)胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）,，快速將其置入37℃水浴中解凍,，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁,；
2）將凍存管中的細(xì)胞移至含10ml*培養(yǎng)基的15ml離心管中,， 1000rpm離心5min；
3）棄上清,，沉淀用5ml*培養(yǎng)基重懸,，接種25cm2培養(yǎng)瓶，于37℃,，5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
4）第二天，換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。
注：懸浮細(xì)胞運(yùn)輸中會(huì)有少些細(xì)胞因?yàn)榕鲎擦呀猱a(chǎn)生碎片,，收到細(xì)胞如碎片較多時(shí)，胎牛血清可以用15%培養(yǎng)三天,，利于細(xì)胞盡快恢復(fù)狀態(tài),，細(xì)胞穩(wěn)定后再調(diào)回10%即可（正常條件下20%培養(yǎng)的可加至25%）。