日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

氨基酸(AA)測定試劑盒分光光度法說明書

                                               分光光度法  50管/48樣

 

注    意：正式測定之前選擇2-3個預期差異大的樣本做預測定,。

測定意義：

肝臟,、腎臟是氨基酸代謝的主要器官,，故尿中氨基酸的變化最能反應肝、腎的生理狀態(tài),。另外,，氨基酸還能反應灼傷、傷寒等方面情況,。植物體內(nèi)氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發(fā)育時期氮代謝變化,、植物對氮素的吸收、運輸,、同化及營養(yǎng)狀況等有重要意義,。

 

測定原理：

氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應，產(chǎn)生藍紫色化合物,，在570 nm有特征吸收峰,；通過測定570 nm吸光度，來計算氨基酸含量,。

 

自備儀器及用品：

臺式離心機,、可見分光光度計,、水浴鍋、1mL玻璃比色皿,、可調(diào)式移液槍,、研缽、無水乙醇,、冰和蒸餾水,。

 

試劑組成和配制：

試劑一：液體×1瓶，4℃保存,。

試劑二：液體×1瓶,，4℃保存。

試劑三：粉劑×1瓶（棕色）,，4℃避光保存,。臨用前加入2 mL無水乙醇，蓋緊后充分混勻,，再加入28mL蒸餾水混勻，避光保存,。

試劑四：粉劑×1瓶,，4℃避光保存。臨用前加5 mL蒸餾水,，充分溶解,。

標準品：粉劑×1瓶，臨用前加10 mL蒸餾水,，充分溶解,。1μmol/mL標準液，4℃避光保存,。

 氨基酸(AA)測定試劑盒分光光度法說明書

樣品中AA提?。?/span>

1. 按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）進行室溫勻漿,，然后轉(zhuǎn)移到1.5 mL EP 管中,，蓋緊后（防止水分散失）置于沸水浴提取15 min；自來水冷卻后,，8000g,，4℃離心10min，上清液置冰上待測,。

2. 細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),，離心后棄上清；按照細菌或細胞數(shù)量（10⁴個）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1mL試劑一）,，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴,，功率20％或200W,，超聲3s，間隔10s,，重復30次）,；8000g，4℃離心10min,，取上清,，置冰上待測。

3. 血清等液體：直接檢測,。

 

測定操作：

1. 分光光度計預熱30 min,，調(diào)節(jié)波長到570 nm，蒸餾水調(diào)零,。

2. 空白管：取EP管,，加入50μL蒸餾水，500μL試劑二,，500μL試劑三和50μL試劑四,，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失），置于沸水浴中保溫15 min,，冷卻后反復顛倒EP管數(shù)次,，于570nm測定吸光值，記為A空白管,。顯色后務必在30min內(nèi)測完,。

3. 標準管：取EP管，加入50μL標準品,，500μL試劑二,，500μL試劑三和50μL試劑四，混勻后蓋緊瓶蓋

 

（防止水分散失）,，置于沸水浴中保溫15 min,，冷卻后反復顛倒EP管數(shù)次，于570nm測定吸光值,，記為A標準管,。顯色后務必在30min內(nèi)測完。

4. 測定管：取EP管,，加入50μL上清液,，500μL試劑二，500μL試劑三和50μL試劑四,，混勻后蓋緊瓶蓋（防止水分散失）,，置于沸水浴中保溫15 min，冷卻后反復顛倒EP管數(shù)次,，于570nm測定吸光值,，記為A測定管,。顯色后務必在30min內(nèi)測完。

注意：空白管和標準管只需要測定一次,。

 

氨基酸含量計算公式：

（1）按照樣本質(zhì)量計算

氨基酸含量（μmol /g鮮重）=[C標準品×V標準品×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)]×（V樣總÷V樣）÷W

=1×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管) ÷W

（2）按照樣本蛋白濃度計算

氨基酸含量（μmol /mg prot）=[C標準品×V標準品×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)]÷（V樣×Cpr）

=1×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管) ÷Cpr

（3）按照細胞數(shù)量計算

氨基酸含量（μmol /10⁴ cell）=[C標準品×V標準品×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)] ×（V樣總÷V樣×細胞數(shù)量）

=1×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管) ÷細胞數(shù)量

（4）按照液體體積計算

氨基酸含量（μmol /mL）=[C標準品×V標準品×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)]÷V樣

=1×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)

C標準品：標準品濃度,，1 μ mol/mL；V標準品：反應體系中加入標準品體積,，0.05 mL,；W：樣品質(zhì)量，g,；V樣：反應體系中加入樣品提取液體積,，0.05 mL；V樣總：樣品提取液總體積,，1mL,，Cpr：樣本蛋白濃度，mg/mL,。

 

注意事項：

1. 試劑盒中試劑三,、試劑四和標準品均需臨用前配制，且避光保存,，配制好未使用完的4℃保存且3天內(nèi)使用完畢,。

2. 為保證實驗結(jié)果的準確性，需先取1-2個樣做預實驗,，如果測定的吸光值過高（高于2.5）,，用蒸餾水稀釋后再測定,。

3. 脯氨酸和羥脯氨酸與茚三酮反應在570nm處無吸收峰,，因此，570nm處測定結(jié)果不含這兩種氨基酸的量,。

4檢出限為100μmol/L,。

氨基酸(AA)測定試劑盒分光光度法說明書