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組織活性氧(ROS)檢測試劑盒（DHE）簡介
閱讀：4311 發(fā)布時間：2022-8-15
組織活性氧(ROS)檢測試劑盒（DHE）
一,、產(chǎn)品簡介：
組織活性氧檢測試劑盒是一種利用熒光探針DHE進行組織活性氧檢測的試劑盒,。本試劑盒中的DHE ROS探針為紅色熒光的活性氧探針,，具有510/610nm的最大激發(fā)/發(fā)射波長,。DHE ROS探針在組織中活性氧存在的條件下,，被氧化生成紅色熒光物質(zhì)，紅色熒光強度與組織內(nèi)活性氧水平成正比,，檢測 DHE 產(chǎn)物的熒光強度就可以知道組織內(nèi)活性氧的水平,。 在激發(fā)波長510nm，發(fā)射波長610nm附近,，使用熒光分光光度計,、熒光酶標(biāo)儀、等檢測DHE產(chǎn)物熒光，從而測定組織內(nèi)活性氧水平,?；钚匝?Reactive oxygen species, ROS)包括過氧化氫（H2O2，Hydrogen peroxide）,、羥基自由基（•OH,，Hydroxyl radical）、單線態(tài)氧（1O2,，Singlet oxygen）,、 一氧化氮（NO，Nitric oxide）,、超氧陰離子(•O2-,，Superoxide anion)、過氧化自由基(ROO•,，Peroxylradical),、過氧羥自由基（HOO•，hydroperoxyl）及其下游產(chǎn)物過氧化物過氧亞硝基陰離子
（ONOO-,，Peroxynitrite anion）,、ClO-和羥化物等，參與細胞生長增殖,、發(fā)育分化,、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程。
活性氧（reactive oxygen species,，ROS）的產(chǎn)生主要是氧化磷酸化的結(jié)果,，在呼吸鏈中，在某些位點會有“泄露”的電子直接和氧氣或和其他電子受體反應(yīng),，在酶或非酶作用下引發(fā) 一系列反應(yīng)生成不同種類的活性氧：“泄露”的電子最初和氧氣反應(yīng)生成超氧陰離子自由基（O2•-）,。超氧陰離子遇水生成 H2O2，同時過氧化氫也可由氧氣在單 胺氧化酶（monoamine oxidase,，MAO）的作用下生成,，生成的過氧化氫在髓過氧化物酶（myeloperoxidase, MPO）的催化下與 Cl-反應(yīng)可生成ClO-，在鐵或銅離子的催化下發(fā)生Fenton反應(yīng)生成OH•,，超氧陰離子遇氮氧化物反應(yīng)生成ONOO-,。這些生成的高氧化活性的物質(zhì)統(tǒng)稱為活性氧。
適用：新鮮組織,， 一般最好使用新鮮組織樣本檢測活性氧,，反映的是組織當(dāng)時的活性氧狀態(tài)。凍存的組織樣本的ROS在長期凍存過程中會損失掉,，有條件的話就使用新鮮樣本,，不建議使用凍存的組織樣本。已經(jīng)凍存的組織樣本中殘余的ROS也可以用本試劑盒檢測。
二,、產(chǎn)品組成：
| 名稱規(guī)格 | 100T | 200T |
| 勻漿緩沖液 A | 100 ml | 2*100 ml |
| DHE 活性氧探針 | 200 μl | 2*200 μl |
| 說明書 | 一份 | |
三,、自備材料：
1、熒光分光光度計或熒光酶標(biāo)儀,，離心機,，移液器，冰箱,，冰盒
2,、PBS 緩沖液或者 HBSS
3、離心管,，吸頭,，一次性手套，熒光檢測專用黑色 96孔板
組織活性氧(ROS)檢測試劑盒（DHE）
四,、操作步驟(僅供參考)：
1,、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體收集至管底,，避免開蓋時液體灑落,。
2、熒光探針標(biāo)記后,，一定要洗凈殘余的未進入細胞內(nèi)的探針,，否則會導(dǎo)致背景較高。
3,、探針標(biāo)記完畢并洗凈殘余探針后,，可以進行激發(fā)波長的掃描和發(fā)射波長的掃描，以確認探針的標(biāo)記情況是否正常,。
4,、盡量縮短探針標(biāo)記后到測定所用的時間，以減少各種可能的誤差,。
5,、原位檢測必須使用熒光檢測專用的黑色透明底96孔細胞培養(yǎng)板。
6,、操作步驟僅供參考,，請根據(jù)實際樣本情況調(diào)整。
五,、注意事項：
1,、正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗,，以優(yōu)化實驗條件,，取得最佳實驗效果。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,，避免開蓋時試劑損失。
3,、禁止與其他品牌的試劑混用,，否則會影響使用效果。
4,、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果,。
5、最好使用一次性吸頭,、管,、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑,。
6,、實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
7,、避免反復(fù)凍融,。
8、可以根據(jù)需要分裝后凍存,。
9,、探針為DMSO溶液，在 2-8℃時是固體狀態(tài),，冬季氣溫較低時為凝固狀態(tài),，極易粘附在管壁、吸頭壁,。注意需要加熱融解,，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋,。
六,、有效期：-20 ℃避光有效期為一年
組織活性氧(ROS)檢測試劑盒（DHE）