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肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點(diǎn)微板法)

 

一,、產(chǎn)品簡介：

肌酉酐(creatinine ,Cr)是人體或動(dòng)物肌肉內(nèi)代謝的產(chǎn)物,，每20g肌肉代謝可產(chǎn)生約1mg肌酐,，由腎小球?yàn)V過排出體外,，外源性肌酐是肉類食物在體內(nèi)代謝后的產(chǎn)物,，內(nèi)源性肌酐是體內(nèi)肌肉組織代謝的產(chǎn)物,。

雅吉生物肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點(diǎn)比色法)檢測原理是肌酐與鹽發(fā)生Jaffe反應(yīng)，生成橘紅色的苦肌酐復(fù)合物,，該復(fù)合物生成量與肌酐含量呈正比,，通過酶標(biāo)儀測定510nm 處吸光度，可用于檢測人體,、動(dòng)物的血漿,、血清、尿液樣品中肌酐含量,。該試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,，不適用于臨床診斷或其他用途。

 

二,、產(chǎn)品組成：

 肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點(diǎn)微板法)

三,、自備材料：

1、1.5ml離心管,、96孔板

2,、離心機(jī)、酶標(biāo)儀

3,、蒸餾水

 

四,、操作步驟(僅供參考)：

1、準(zhǔn)備樣品︰血漿,、血清按照常規(guī)方法制備,，-20℃凍存。取血清或血漿0.05ml,，加入蛋白沉淀液0.45ml,，充分混勻,，靜置5min后3500r/min離心10min，取上清液,，4℃保存待用;尿液中肌酐含量較高,，應(yīng)先用蒸餾水作50~200倍稀釋后再測。

2,、配制標(biāo)準(zhǔn)品工作液︰取肌酐標(biāo)準(zhǔn)(10mmol/L),，按肌酐標(biāo)準(zhǔn)(10mmol/L)∶肌酐標(biāo)準(zhǔn)稀釋液=1:99的比例混合，使?jié)舛冗_(dá)到100μmol/L,，即為標(biāo)準(zhǔn)品工作液-肌酐標(biāo)準(zhǔn)(100μmol/L);4℃保存,，1周有效。

3,、Cr加樣:按照下表設(shè)置空白孔,、標(biāo)準(zhǔn)孔、測定孔,，溶液應(yīng)按照順序依次加入,，并注意避免產(chǎn)生氣泡。如果樣品中的Cr濃度過高,，可以減少樣品用量或適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測定,。

 

 

 肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點(diǎn)微板法)

 

4、Cr檢測︰充分混勻,，室溫放置15min,，酶標(biāo)儀檢測510nm吸光度，空白孔調(diào)零,，讀取各孔吸光度,，分別為A標(biāo)準(zhǔn)、A測定,。

 

計(jì)算：

 

血清(漿)肌西酐(μmol/L)=(A測定/A標(biāo)準(zhǔn))×100

尿液肌西(μmol/d)=(A測定/A標(biāo)準(zhǔn))×100×N×24h尿量(L)

式中∶

A測定=測定孔的吸光度

A標(biāo)準(zhǔn)=標(biāo)準(zhǔn)孔的吸光度

N=尿液稀釋倍數(shù)

內(nèi)生肌酐清除率值(L/24h)=尿液肌酐(μmol/L)/血清肌酐(μmol/L)×24h尿量(L)

校正的內(nèi)生肌酐清除率值(L/24h)=內(nèi)生肌酐清除率值×1.73/體表面積(m2)

注︰以正常人24h內(nèi)生肌酐清除率值為128L(即24h 內(nèi)有128L血液中的肌酐通過腎臟被清除)作為*,，則內(nèi)生肌酐清除率(%)=校正的內(nèi)生肌酐清除率值×100/128(或0.78)

單位換算:d=24h

 

參考區(qū)間：

注意事項(xiàng):

1、測定各孔時(shí),，各孔溫度均需達(dá)到室溫,，否則影響結(jié)果。

2,、輕度溶血樣本對肌酐測定無影響﹔尿液樣品中肌酐含量較高,，樣品需做50~200倍稀釋，如果顯色后吸光度仍較高,，還需將尿液繼續(xù)擴(kuò)大稀釋倍數(shù)，重新檢測,。

3,、呈色后標(biāo)準(zhǔn)管吸光度較穩(wěn)定,，但測定管吸光度隨時(shí)間延長而增加﹔另外肌酐濃度越高，吸光度變化越快,，因此加入顯色劑后30min內(nèi)完成檢測為宜,。

4、以標(biāo)準(zhǔn)品做梯度實(shí)驗(yàn),，200μmol/L以下濃度呈不同程度的黃色-橙黃色,，超過200μmol/L顏色逐漸加深，呈橘紅色,，到1000μmol/L呈深橘紅色;用酶標(biāo)儀測定100μmol/L,，吸光度值在0.3左右。

有效期:12個(gè)月有效,。

附錄∶標(biāo)準(zhǔn)曲線制作:在室溫條件下按說明書操作,，用酶標(biāo)儀505nm對標(biāo)準(zhǔn)梯度進(jìn)行吸光度的測定，其數(shù)值及標(biāo)準(zhǔn)曲線如下(僅供參考)︰

 肌酐(Cr)檢測試劑盒(去蛋白終點(diǎn)微板法)