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微球數(shù)量太少？這三點一定要注意
閱讀：589 發(fā)布時間：2021-1-8提及多因子的定量檢測，越來越多的小伙伴會一個想到 Luminex 技術,。Luminex 基于微球設計原理,，可以在 1 張 96 孔板中定量檢測多達 100 種分析物，僅需少量樣本,，節(jié)約時間,、經(jīng)費，可謂一舉多得,。
R&D Systems® 擁有 Luminex Assay 以及 Luminex High Performance Assay 兩個產(chǎn)品系列,，均基于帶有顏色編碼的微球，這些微球表面包被了識別不同目標分析物的特異性抗體,。當預包被的微球與待檢樣本孵育時,，分析物被微球捕獲,，經(jīng)由生物素標記的特異性檢測抗體混合物識別，加入鏈霉親和素 - PE 熒光素底物后發(fā)光并進行定量檢測,。
01 樣品粘稠,，未有效稀釋
解決方法：測定前，如果是凍存的血清 / 血漿樣品,，一步需將樣品充分解凍（如果樣本包含碎片的話也會影響數(shù)據(jù)的讀?。＝ㄗh在加樣前,，將樣本進行 16,000 x g 離心 4 分鐘,，特殊情況下可能要離心更長的時間，再用 Calibrator diluent 按照建議的稀釋比對樣本進行稀釋,。
02 進樣針孔堵塞,，進樣針高度不正確
解決方法：以上兩種情況都會導致沒有充足的微球進入，前者需用超聲的方法清洗針孔,，如有需要進行替換,；后者需確定進樣針的高度并調整至合適位置。
也可以進入維護頁面,，點擊 Cmds&Routines,，使用 0.1 N NaOH 運行深度清洗。
03 操作有誤,，清洗步驟中孔板未附磁力架
解決方法：這是新手常常會出現(xiàn)的失誤,。對于磁珠形式的微球，切記清洗時整個過程都要附有磁力架,，確定磁力架正確地結合在微孔板上,，洗板時磁力架應置于微孔板底部，棄去洗滌液前應靜置 1 分鐘,。不要吸干,，以防止磁珠丟失。
如果磁珠數(shù)量少,，建議好不要用自動洗板機清洗,，我們發(fā)現(xiàn)自動洗板機清洗可能會造成磁珠聚集，從而影響其數(shù)量,。
?在實際的 Luminex 實驗操作中,，有客戶經(jīng)常碰到微球數(shù)少于 50 個甚至只有幾個的問題，大地影響了實驗結果,，其可能的原因和解決方法有哪些呢,？
如下為正確的手動洗板方式：
