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植物總酚試劑盒
閱讀：301 發(fā)布時間：2020-12-23植物總酚（Total Phenols,，TP）試劑盒說明書
微量法 100T/48S
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義：
植物酚類物質(zhì)具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有較高的營養(yǎng)價值和醫(yī)療保健作用
而廣泛應(yīng)用于化妝品,、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域,。
測定原理：
在堿性條件下,，酚類物質(zhì)將鎢鉬酸還原，產(chǎn)生藍色化合物,，在 760nm 處有特征吸收峰,，測
760nm 處的吸光值，即可得樣品總酚含量,。
自備實驗用品及儀器：
天平,、烘箱、粉碎儀,、篩子,、超聲破碎儀、60%乙醇,、離心機、可見分光光度計/酶標儀,、
微量石英比色皿/96 孔板,、蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液：60%乙醇,，自備,。
試劑一：液體 3mL×1 瓶，4℃保存,。
試劑二：液體 5mL×1 瓶,，4℃保存。
總酚提?。?/span>
將樣本烘干至恒重,，粉碎，過 40 目篩之后,，稱取約 0.1g,，加入 2.5mL 提取液，用超聲提取
法進行提取,，超聲功率 300W,，破碎 5s，間歇 8s,，60℃,，提取 30min,。10000g，25℃,，離心
10min,，取上清，用提取液定容至 2.5mL,，待測,。
測定操作表：
1、 分光光度計/酶標儀預(yù)熱 30min,，調(diào)節(jié)波長至 760nm,，蒸餾水調(diào)零。
2,、操作表
對照管 測定管
樣本待測液（µL） 10 10
試劑一（µL） 50
混勻,，25℃靜置 2min
試劑二（µL） 50 50
H2O（µL） 140 90
混勻，25℃靜置 10 min,，于微量石英比色皿/96 孔板中,，測定 760nm 吸光值，ΔA=A 測定-A
對照,。
總酚含量計算公式：
a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下
標準曲線：y = 5.615x+0.0012,，R
2 = 0.9994
總酚含量（mg/g）=（ΔA-0.0012 ）÷5.615×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×W）
= 8.93×（ΔA–0.0012 ）÷W
V 樣總：加入提取液體積，2.5 mL,； V 反總：反應(yīng)總體積,，0.2mL；V 樣：反應(yīng)中樣品體積,，
0.01mL,；W：樣品質(zhì)量，g,。
b.用 96 孔板測定的計算公式如下
標準曲線：y = 2.808x+0.0012,，R
2 = 0.9994
總酚含量（mg/g）=（ΔA-0.0012 ）÷2.808×V 反總÷（V 樣÷V 樣總×W）
= 17.86×（ΔA–0.0012 ）÷W
V 樣總：加入提取液體積，2.5 mL,； V 反總：反應(yīng)總體積,，0.2mL；V 樣：反應(yīng)中樣品體積,，
0.01mL,；W：樣品質(zhì)量，g,。
注意事項：
1. 吸光值大于 2,，樣品適當(dāng)稀釋再測定，注意計算公式里乘以稀釋倍數(shù)。
2. 試劑一對皮膚有一定的刺激性,，請操作時做好防護措施,。
3. ，低檢出限為 2.4 μ g/g,。