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植物(Plant)淀粉合成酶(GBSS)ELISA Kit
閱讀:316 發(fā)布時(shí)間:2020-11-13酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定(enzyme linked immunosorbent assay,,ELISA)是酶免疫測(cè)定技術(shù)中應(yīng)用廣泛的技術(shù)。1971年瑞典學(xué)者Engvail和Perlmann,荷蘭學(xué)者Van Weerman和Schuurs分別報(bào)道將免疫技術(shù)發(fā)展為檢測(cè)體液中微量物質(zhì)的固相免疫測(cè)定方法,,即酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法 (enzyme-linked immunosorbent assay , ELISA) ,。ELISA已成為分析化學(xué)領(lǐng)域中的前沿課題 ,它是一種特殊的試劑分析方法,,是在免疫酶技術(shù)( immunoenzymatic techniques ) 的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新型的免疫測(cè)定技術(shù),。
ELISA 的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),,受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例,。加入酶反應(yīng)的底物后,,底物被酶催化水解或氧化還原反應(yīng)而成為有色產(chǎn)物,,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析,。由于酶的催化效率很高,,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度,。所生成有色產(chǎn)物的顏色深淺與欲測(cè)的抗原(抗體)含量成正比,。 這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡,、電子顯微鏡觀察,,也可以用分光光度計(jì)(酶標(biāo)儀)加以測(cè)定。其方法簡(jiǎn)單,,方便迅速,,特異性強(qiáng)。
ELISA可用于測(cè)定抗原,,也可用于測(cè)定抗體,。該法適于測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清,、血漿及組織液中的樣本,,干擾小可以測(cè)到每毫升納克水平的細(xì)胞因子(或受體)的水平。