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測定意義： 

土壤汞污染能夠通過食物鏈傳遞和富集,，對植物,、動物和人類健康產(chǎn)生威脅,。礦山開發(fā),、工 業(yè)加工、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生活垃圾常常造成土壤汞污染,，因此評價和防止土壤重金屬污染常常需 要測定土壤汞含量,。 

測定原理： 

土壤經(jīng)消化后，汞以 Hg2+離子形式存在,；Hg2+能與二硫腙生成橙色絡(luò)合物,，溶于三氯甲烷 后，在 490nm 測定吸光度,，即可計算 S-Hg 含量

 

土壤汞（S-Hg）濃度檢測試劑盒說明書
 微量法 100T/96S
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定,。
測定意義：
土壤汞污染能夠通過食物鏈傳遞和富集，對植物,、動物和人類健康產(chǎn)生威脅,。礦山開發(fā)、工
業(yè)加工,、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生活垃圾常常造成土壤汞污染,，因此評價和防止土壤重金屬污染常常需
要測定土壤汞含量。
測定原理：
土壤經(jīng)消化后,，汞以 Hg2+離子形式存在,；Hg2+能與二硫腙生成橙色絡(luò)合物，溶于三氯甲烷
后,，在 490nm 測定吸光度,，即可計算 S-Hg 含量。
自備儀器和用品：
可見分光光度計/酶標(biāo)儀,、微量玻璃比色皿/96 孔板,、恒溫水浴鍋、可調(diào)式移液槍,、100 目篩
（可更?。饬蛩?、濃鹽酸,、濃硝酸、三氯甲烷和蒸餾水,。
試劑組成和配制：
標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1 支,，4nmol/mL Hg 標(biāo)準(zhǔn)液，4℃保存,。
試劑一：自備,。在該試劑瓶中加入 52mL 蒸餾水，36 mL 濃鹽酸,，12mL 濃硝酸,，混勻,，4℃
避光保存。
試劑二：粉劑×1 瓶,，4℃避光保存,。臨用前加 18.4 mL 蒸餾水充分溶解。
試劑三：粉劑×1 瓶,，4℃保存,。臨用前加 3 mL 蒸餾水充分溶解。
試劑四：粉劑×1 支,，4℃保存,。臨用前加 1.5 mL 蒸餾水充分溶解。
試劑五：粉劑×1 瓶,，4℃保存,。臨用前加 5.2 mL 蒸餾水充分溶解。
試劑六：粉劑×1 瓶,，4℃避光保存,。臨用前加 20 mL 三氯甲烷充分溶解。
S-Hg 檢測：
1. 分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30 min,，體積波長到 490 nm,，三氯甲烷調(diào)零。
2. 樣品管：風(fēng)干的土壤,，過 100 目篩后精卻稱取 0.1 g 左右,，裝入 EP 管；加入 1 mL 試劑一,，
充分混勻后沸水浴消化 60 min,。取出冷卻后室溫 8000g 離心 10min，吸取 20 μL 上清液加入
新的 EP 管,；再先后加入 180 μL 蒸餾水和 20 μL 濃硫酸,，混勻,；后加入 180 μL 試劑二,，
混勻后 40℃水浴 24h，期間震蕩數(shù)次,。
2. 標(biāo)準(zhǔn)管：取 EP 管,，加入 20 μL 標(biāo)準(zhǔn)液，180 μL 蒸餾水和 20 μL 濃硫酸,，混勻,；后加入
180 μL 試劑二，混勻后 40℃水浴 24h,，期間震蕩數(shù)次,。
3. 加入 20 μL 試劑三,，震蕩直到無色；開蓋靜置 30min,，期間搖蕩數(shù)次,，以排出氣體。
4. 加入 10 μL 試劑四,，充分混勻后靜置 5min,；加入 50μL 試劑五，蓋緊后震蕩至少 1min,，
靜置 10min 以分層,。
5. 小心吸取 20 μL 下層溶液，加入 200 μL 試劑六,，震蕩使無色,，靜置 10 min 以分層。
6. 小心吸取 140 μL 下層溶液,，加入微量玻璃比色皿/96 孔板,，于 490nm 處比色，記錄各管
吸光值,。記為 A 樣品管和 A 標(biāo)準(zhǔn)管,。
注意：標(biāo)準(zhǔn)管只需測定一次。
S-Hg 濃度計算公式：
a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下
Hg（nmol Hg/g 土壤）=[C 標(biāo)×(A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管)]×V 總÷V 樣÷W
 =200×(A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管)÷W
C 標(biāo)：標(biāo)準(zhǔn)液濃度,，4 nmol/mL Hg,；V 總：上清液總體積，1 mL,；W：土樣質(zhì)量,，g；V 樣：

加入上清液體積,，20 μL=0.02 mL,。
b.使用 96 孔板測定的計算公式如下
Hg（nmol Hg/g 土壤）=[C 標(biāo)×(A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管)]×V 總÷V 樣÷W
 =200×(A 測定管÷A 標(biāo)準(zhǔn)管)÷W
C 標(biāo)：標(biāo)準(zhǔn)液濃度，4 nmol/mL Hg,；V 總：上清液總體積,，1 mL；W：土樣質(zhì)量,，g,；V 樣：
加入上清液體積，20 μL=0.02 mL,。
注意事項(xiàng)：
1,、試劑一有刺激性氣味，易揮發(fā)，實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)注意佩戴口罩和手套,，使用完立即蓋好蓋
子,，以免試劑不夠；
2,、測定過程中需加入濃硫酸,，加濃硫酸時需注意，避免濺到皮膚或眼睛上,；
3,、靜置分層后，用 1mL 移液槍,，排除空氣后,，輕輕插入下層溶液中，緩慢吸取下層溶液,。