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樣本的制備是IHC實驗成功的前提條件。樣本完成石蠟包埋后，需要成約3-4um的薄片,。本文主要介紹了切片小技巧及過程中容易出現(xiàn)的16種問題

 

 

 

切片小技巧

 

②切片厚度3-4μm（淋巴結、扁桃體,、鼻咽,、扁桃體2-3μm；脂肪5-6μm）

 

④切片動作輕,，用力均勻,。

 

⑥刀片鋒利,，切片角度5°，切片平整無褶皺和收縮,。

 

⑧蠟塊表面有鈣點,，應20%HCL表面泡1-2h，水洗后切,。

 

切片光面朝下展片,、撈片。

 

?攤片水溫利于展平又不熔化,，必要時用20%酒精攤片,。

 

?細小組織（穿刺、內(nèi)鏡小標本）可以多貼幾個,。

 

?在烘烤切片前應做好排水,，烤片溫度高于石蠟熔點5-10℃。

 

 

 

 

 

問題1 細胞皺縮和收縮,；核“起泡”變大損傷,；膠原染色嗜堿性

 

原因：石蠟溫度過高。

 

解決方法：烤箱溫度高于石蠟熔點5-10℃為佳,。

 

 

問題2 切片卷成致密團

 

原因：①刀鈍,；②傾斜角太小,；③切片太厚,。

 

解決方法：①換新刀片；②如果間隙角充分,，降低傾刀的斜度,。

 

 

 

①組織固定,、脫水,、透明不*，浸蠟不透,；浸蠟包埋溫度過高或時間過久,。

 

解決方法：問題4過分的壓縮

 

原因：刀片鈍；組織或石蠟過軟,；用力太猛,，速度太快。

 

解決方法：②③

 

原因：刀刃不鋒利,，刀間隙角度大,；蠟塊內(nèi)組織上下端留蠟邊太少或不整齊，刀邊碎片,；室溫過低或石蠟過硬,。

 

移動刀口或更換刀片,，檢查刀的角度，清潔刀片和刀架背面,；在低熔點的石蠟中重新包埋,；提高室內(nèi)溫度或溫暖蠟塊表面（哈氣等）；切片厚度適宜（根據(jù)組織類型）,。

 

 

 

①②③④①②③④水,，開啟加濕器；問題7 切片條帶彎曲不直

 

原因：②蠟塊下邊與刀口不平行,；④組織本身硬度不一致,。

 

③移動刀片或更換刀片；問題8 蠟塊組織脫落

 

原因：②蠟塊凍時間過長,，切片時易出現(xiàn)蠟塊脫落現(xiàn)象,。

 

②切片動作小、勻速,。

 

 

 

①取材時未取中病灶,，組織塊太大，太厚,；③組織塊內(nèi)組織不平坦,；⑤切片時粗修過多（切削過深）或過少（沒切到足夠的深度）。

 

解決方法：②組織在包埋模中均勻鋪平,；④切片方向：軟到硬,，易到難，主到次,。

 

 

 

①切片機維護不當,，切片厚度設置錯誤；③石蠟過熱,；解決方法：①降低切片厚度設置,；③使用適合組織類型和密度熔點的石蠟；問題11 切片縱裂,，損傷,，刀痕

 

原因：②刀片缺口；④石蠟中有雜質,。

 

①更換刀片或移動刀口,；③仔細清潔刀刃以除去多余的石蠟堆積；問題12 切片厚薄不均勻/刀/百葉窗/搓衣板

 

原因：②切片刀不鋒利,，刀間隙角（或傾斜度）太大,；④切片機部件松動或磨損；⑤組織致密或堅實；⑥主軸伸出太長,。解決方法：②更換刀片,，減少傾斜度；④均速慢切,；⑥主軸搖回復原,。

 

 

 

①攤片溫度不合適，組織未充分伸展,；③石蠟熔點低,，過軟或室溫較高；④組織缺乏一致性,。

 

①調(diào)小刀角度,，邊切邊向蠟塊吹氣用10-20%酒精攤片，利用濃度差,，水的張力來展片,；③更換刀片或移動刀口；問題14 切片裂縫/碎裂

 

原因：②攤片水溫過高,，攤片時間長導致過度延伸,；④烤片前切片排水不凈。

 

解決方法：②在攤片時輕輕延伸蠟帶,，去除褶皺和折疊,；④在切片和漂片過程中，小心操作蠟帶,；問題15 柵狀裂和龜裂

 

原因：②攤片水溫過高,；④切片過程中過度冷凍。

 

解決方法：②降低攤片水溫,；④勻速慢切,，邊切邊對蠟塊吹氣。

 

 

 

撈片時切片下面有氣泡,。

 

解決方法：②切片要干凈無污染,；<span font-size:14px;"="" style="margin: 0px; padding: 0px;">③撈片前將組織下的氣泡趕走