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犬維生素E(VE)Elisa試劑盒
閱讀:265 發(fā)布時間:2020-7-9如需更加詳細的說明書文檔,,請聯(lián)系右側(cè)在線客服索取
使用目的:
本試劑盒用于測定血清、血漿及相關液體樣本中的指標含量,。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中指標水平,。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,,與HRP標記的抗體結(jié)合,,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的指標呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),,通過標準曲線計算濃度。
試劑盒組成
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準品 | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
操作步驟
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,,用戶可在小試管中進行稀釋,。
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同),、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻,。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復5次,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行,。