日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

一、為什么要用同型對照,？
    同型對照是使用與一抗相同種屬來源,、相同亞型、相同劑量和相同的免疫球蛋白及亞型的免疫球蛋白,，用于消除由于抗體非特異性與細(xì)胞結(jié)合而產(chǎn)生的背景染色,。同型對照是真正意思上的陰性對照，它不但可以用來設(shè)定流式細(xì)胞儀的電壓,，而且還可以幫忙省去昂貴與繁瑣的重組細(xì)胞因子競爭封閉步驟,。
在流式細(xì)胞儀上樣前，染色方式如下：樣本管：一抗＋樣本,，同型對照管：同型對照＋樣本

二,、如何選擇同型對照？
(1)一般選擇與一抗的成分*相同種屬來源,、相同亞型和亞鏈,、相同熒光標(biāo)記的抗體，比如抗人的CD56 FITC標(biāo)記的抗體,，成份是MouseIgG1,κ,。那么它的同型對照應(yīng)該是FITC標(biāo)記的MouseIgG1,κ。注意同型對照的成份跟它的名稱是相同的,。
(2)如果是抗體的組合形式是純化的一抗＋熒光標(biāo)記的二抗,，那么應(yīng)該選擇一抗的同型對照。比如CD86的純化抗體，成分是MouseIgG1,κ,。它的同型對照是純化的Mouse IgG1,κ,。它的二抗PE標(biāo)記的抗小鼠IgG1,。那么染色方式如下：樣本管：純化的CD86＋PE標(biāo)記的抗Mouse IgG1(二抗)＋樣本,同型對照管：純化的同型對照＋PE標(biāo)記的抗MouseIgG1(二抗 )＋樣本.
(3)如果沒有找到適合的同型對照,，在保持來源相同,、熒光標(biāo)記相同、免疫球蛋白類別相同條件下,，那么優(yōu)先選擇的順序應(yīng)該是亞鏈不同--亞型不同--相同類別,。比如，某種的抗體的來源是Mouse IgG2а,κ,。如果在同型對照表里面找到不到*相同的同型對照,，那么優(yōu)先選擇相同熒光標(biāo)記Mouse IgG2а為同型對照。如果也沒有找到MouseIgG2а,，那么優(yōu)先選擇相同熒光標(biāo)記的MouseIgG2b作為同型對照,。如果后還是沒有找到Mouse IgG2b，那么選者相同熒光標(biāo)記的MouseIgG2作為同型對照,。
 

三,、哪些客戶需要使用同型對照？
A 對流式不是非常熟悉的客戶,。
B 做胞內(nèi)流式客戶,，比如胞內(nèi)細(xì)胞因子、趨化因子和信號蛋白等,。
C 使用不常見的標(biāo)志或者特異性不高的標(biāo)志的客戶,，因?yàn)榭蛻舨皇煜げ怀Ｒ姌?biāo)志的表達(dá)情況，根據(jù)同型對照可以判斷陽性細(xì)胞的位置,。一些特異性不高的抗體,，如多抗，非特異性結(jié)合非常多,，使用同型對照可排除假陽性,。
D 對流式非常熟悉又使用常用的表面標(biāo)志的客戶，一般可以不使用同型對照,。
 

四,、為什么有時(shí)候同型對照的表達(dá)會(huì)比抗體的表達(dá)高？
    首先需要檢查同型對照的抗體是否加錯(cuò)類型,、劑量等,。其次，因?yàn)橛行?biāo)志在細(xì)胞的表面或者胞內(nèi)表達(dá)不高,，而跟其類似的抗原非常多,，那么加入同型對照時(shí),，同型對照非特異性的結(jié)合會(huì)超過抗體的特異性，所以會(huì)造成這種現(xiàn)象,。這個(gè)時(shí)候推薦使用其他陰性對照,，如空白對照等。